论文部分内容阅读
论文以新疆裕民无刺红花品种的种子为材料,系统研究了其组织培养和再生体系建立的过程,并对各个阶段的影响因素进行了详细的探讨,并对其多倍体的诱导进行了初步研究,为新疆红花开展生物技术育种奠定了基础,现得结果如下:
1.红花种子消毒依次使用0.1%HgCl2处理17min、75%C2H5OH处理1min、无菌水冲洗4~5遍消毒效果最佳,发芽率和污染率分别为73.2%和9.8%。
2.诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5 mg/L6-BA+0.1 mg/LNAA,愈伤诱导率可达100%,最适合愈伤诱导的外植体为叶片。但愈伤组织再分化困难,出芽率低,芽点玻璃化严重,且不易成活。
3.器官直接发生途径中,茎段优于叶片,其出芽率和增殖系数最高可达18.8%和4.5,丛生芽诱导的最佳培养基为:Ms+0.5 mg/L TDZ+1.0 mg/L BA+0.5 mg/L PP333。
4.最佳生根培养基为:1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA,生根率可达91.8%,平均每株生根数目是8条左右。
5.组培苗移栽的基质以混合基质(珍珠岩:蛭石:营养土/v:v=1:1:1)为最佳,成活率可达90%,且长势良好。
6.用0.002 mol/L8-羟基喹啉与0.1%秋水仙素按1:1混合8h,1mol/L盐酸60℃恒温水浴解离6min制片所得染色体分散效果最佳。核型公式为2n=2X=24m,核型不对称系数(As.k)为58.25%,属于1B类型。
7.秋水仙素加入培养基诱导法采用秋水仙素浓度为0.01%处理10d达到最好效果。变异率为44.4%诱变率,存活率为36%。
8.茎段液体法诱导多倍体时,用0.1%秋水仙素溶液处理2h或4h,变异率为40%~41.2%,存活率可达34%~40%,效果较好。
9.种子处理法用0.1%秋水仙素溶液处理12h效果最好,发芽率和变异率分别为32%和37.5%。
10.茎尖生长点处理法用0.1%秋水仙素溶液对幼苗茎尖处理5-7d诱变率和存活率最好,分别为82.4%~86.7%和50%~56.7%。
11.二倍体和四倍体植株气孔的大小分别为:22.43±0.14μm×19.10±0.07μm和31.28±0.71μm×28.42±0.16μm(长×宽),气孔显著增大;气孔密度分别为121.00±0.58mm-2和83.88±0.36mm-2,气孔密度显著下降。对变异株进行流式细胞仪检测,其中2株为四倍体植株。