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输血是临床最常用的医疗手段之一。但由于血源紧张、配型繁琐及容易交叉感染等原因,近一个世纪以来,寻找安全有效的血液代用品,一直是医学研究的重点和热点之一。血液代用品是兼具携氧和扩容功能的溶液,它必须具备原料充足、无生理毒性、无免疫源性、较好的力学流变性质、较长的保存期和易于进行生理代谢等特点。血液代用品可以分为两大类:一类是基于血红蛋白类氧载体(Hemoglobin based oxygen carriers, HBOCs),另一类是全氟碳化物乳剂(Perfluorocarbon Compounds, PFC)。HBOCs的主要成分为超纯血红蛋白。由于失去了超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(CAT)等活性酶,该体系很容易氧化产生活性氧(ROS)。同时,再灌注本身也产生活性氧对机体造成损伤。血红蛋白(Hb)易被活性氧氧化,形成失去携氧能力的高铁血红蛋白(MetHb),并进一步诱导活性氧自由基的产生。在过氧化氢等氧化物质的不断作用下,Hb不断被氧化,Fe3+Hb和活性氧自由基形成循环,从而加速了输血再灌注损伤,Hb的携氧-释氧能力也被极大减弱。因此这个问题亟需得到解决。因为MetHb含量是影响血液代用品携氧-释氧性能的主要因素之一。所以本文主要分为两部分:一是对血红蛋白和红细胞的释氧规律进行分析研究,以期为制备有效携氧-释氧的HBOCs提供参考。二是选取修饰剂为Mal-mPEG和氮氧自由基,拟探讨Mal-mPEG和氮氧自由基的引入对MetHb产生有何影响,是否能抑制HBOCs氧化。实验结果:通过对高浓度(5 g/dL)的人红细胞或血红蛋白溶液的释氧过程中氧分压的测定分析,得知渗透压、别构剂等因素影响红细胞以及血红蛋白的释氧速率。渗透压越高,RBC释氧速率越快。别构剂改变Hb的构象,氧亲和力降低,是Hb的释氧速率加快。对以Mal-mPEG和马来酰胺氮氧自由基为修饰剂的HBOCs,在不同介导下,MetHb随时间的变化量,发现Mal-mPEG、马来酰胺氮氧自由基以及二者同时修饰,这三种修饰方式,对Hb自氧化的影响不同。Mal-mPEG不能抑制自氧化速率,马来酰胺氮氧自由基可以有效减缓自氧化速率,而二者同时修饰时Hb的自氧化速率也相应降低。