【摘 要】
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目的研究体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal StemCells,MSCs)视网膜下移植后在脉络膜新生血管(Chroidal Neovascularization,CNV)微环境中的分化及其对CNV渗漏情况
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目的研究体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal StemCells,MSCs)视网膜下移植后在脉络膜新生血管(Chroidal Neovascularization,CNV)微环境中的分化及其对CNV渗漏情况的影响。方法体外培养挪威棕色大鼠(Brown Norway,BN)MSCs并经流式细胞仪鉴定CD90(+)CD45(-)后,用Brdu进行标记。用氪绿激光视网膜光凝的方法建立25只大鼠双眼CNV模型,并经眼底荧光血管造影(FluoresceinceAngiography,FA)证实CNV生成。将25只大鼠随机分为5组,每组5只。每只大鼠右眼为实验眼,经玻璃体腔注入视网膜下腔MSCs,左眼视网膜下腔注射等量PBS做为对照。术后1,2,3,4,5周分别做FA检查后处死一组动物,摘除眼球行冰冻病理切片后分别用小鼠抗人BrdU单抗、FITC标记羊抗小鼠二抗和小鼠抗大鼠CD31单抗、小鼠抗大鼠Rhodopsin单抗、小鼠抗大鼠全角蛋白(Pan-Cytokeratin,PCK)单抗、Cy3标记羊抗小鼠二抗双重荧光标记。观察术后1,2,3,4,5周MSCs在CNV微环境中的分化,计算视网膜下腔注射MSCs/PBS前、后FA面积并比较CNV渗漏情况的变化。结果视网膜下移植术后第1周即可见MSCs位于CNV表面,但CD31标记阴性,第2周至第5周可见位于CNV内的MSCsCD31标记阳性,第5周可见移行于RPE层的MSCs rhodopsin和PCK标记阳性。FA分析结果初步表明,实验眼视网膜下移植MSCs后CNV的渗漏面积较对照眼有减少的趋势。结论MSCs移植入CNV模型大鼠视网膜下腔后第2周至第5周可以向内皮细胞方向分化,第5周可以向光感受器细胞方向和RPE方向分化。视网膜下移植MSCs后有可能使CNV渗漏情况得到一定的改善。
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