【摘 要】
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柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)是传播柑橘黄龙病的主要自然传播媒介,因此防治柑橘木虱是抑制柑橘黄龙病传播的主要措施。目前化学防治仍是防治柑橘木虱的主要手段,但不断有报道显示柑橘木虱对吡虫啉等部分杀虫剂已经产生抗性。而环氧虫啶因其具有对环境低毒且杀虫谱广等特点,在对柑橘木虱的田间防控中具有良好的防治效果和重要的应用价值。根据现有报道证实,多种解毒代谢酶参与柑橘木虱对杀虫
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柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)是传播柑橘黄龙病的主要自然传播媒介,因此防治柑橘木虱是抑制柑橘黄龙病传播的主要措施。目前化学防治仍是防治柑橘木虱的主要手段,但不断有报道显示柑橘木虱对吡虫啉等部分杀虫剂已经产生抗性。而环氧虫啶因其具有对环境低毒且杀虫谱广等特点,在对柑橘木虱的田间防控中具有良好的防治效果和重要的应用价值。根据现有报道证实,多种解毒代谢酶参与柑橘木虱对杀虫剂的解毒代谢。基于此,开展柑橘木虱对环氧虫啶解毒代谢机制以及靶标结合力的初步研究,从而为柑橘木虱的科学防控、抗性治理及推动环氧虫啶在农业生产中广泛应用的提供理论依据。(一)采用药膜法测定环氧虫啶和吡虫啉对柑橘木虱两个种群的毒力,环氧虫啶对敏感种群和田间种群的LC50分别为0.13 mg/L、1.3mg/L,吡虫啉对敏感种群和田间种群的LC50分别为0.21 mg/L、6.20 mg/L。结果表明,相较于吡虫啉,环氧虫啶对柑橘木虱的毒力较高,有可能在田间取得更好的防治效果。(二)利用ELISA酶联免疫法分别测定了柑橘木虱两个种群环氧虫啶(LC10)胁迫(12、24、36、48 h)后P450、GSTs、EST酶活性以及ABC转运蛋白含量的变化,结果显示田间种群的酶活性及ABC转运蛋白含量均显著高于敏感种群;田间种群随着环氧虫啶诱导时间增长,酶活性及ABC转运蛋白含量也显著升高;敏感种群的处理组与对照组存在显著差异。结果表明P450、GST、EST酶以及ABC转运蛋白参与了柑橘木虱对环氧虫啶的解毒代谢过程。(三)通过检测与解毒代谢相关的74个解毒酶及转运蛋白基因m RNA的表达量,发现柑橘木虱CYP4C1、Dc GSTd1、EST4以及Dcit ABCH6基因过表达,通过RNAi技术沉默CYP4C1、Dc GSTd1、EST4以及Dcit ABCH6后,柑橘木虱对环氧虫啶的敏感性显著性上升1.5~2.5倍。表明在柑橘木虱中CYP4C1、Dc GSTd1、EST4以及Dcit ABCH6的过表达与环氧虫啶的解毒代谢相关。(四)利用biacore测定柑橘木虱两个种群烟酰乙酰胆碱受体靶标与环氧虫啶和吡虫啉的结合力,结果显示吡虫啉对敏感种群的结合力是田间种群的3.604倍,环氧虫啶对敏感种群的结合力是田间种群的1.405倍。由此表明柑橘木虱对杀虫剂的敏感性降低还可能与靶标结合力有关。
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