溃疡性结肠炎是一种全球性慢性炎症疾病,随着炎症的发展通常伴随着氧化应激性损伤。治疗药物对不同患者有着不同的副作用,不利于机体健康。研究表明,银耳多糖作为一种天然活性物质,对人体无不良影响,且具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗衰老等生物学功能,然而,目前,关于适合银耳多糖的脱蛋白方式研究较少,对于银耳多糖作用于溃疡性结肠炎的研究较少,银耳多糖是否对溃疡性结肠炎具有保护效果尚不明确。本研究以银耳子实体为研究对象,采用水提醇沉法从中提取银耳粗多糖（Tremella polysaccharides,TPS）,再通过Sevage法、Ca Cl₂法、Ca Cl₂-酶复合法、Na Cl法、酶法和三氯乙酸（TCA）法进行脱蛋白,并对筛选到效果较好的Ca Cl₂-酶复合法脱蛋白工艺条件进行优化,以得到一种糖含量高、蛋白含量低且抗氧化活性好的银耳多糖,再利用DEAE-52离子交换柱对所得银耳多糖进行洗脱分离,通过预先给予小鼠银耳多糖并构建溃疡性结肠炎模型,进一步探究银耳多糖对于溃疡性结肠炎是否具有保护作用。结果表明:1.水提醇沉法可有效地从银耳子实体中提取到银耳粗多糖,糖含量达76.5%。六种常用脱蛋白方法均可脱除银耳多糖中的蛋白,脱蛋白后银耳多糖的蛋白含量从5.9%到2.28%不等,其中,Ca Cl₂-酶复合法脱蛋白效果最好,蛋白含量仅为2.28%。Ca Cl₂-酶复合法脱蛋白所得银耳多糖的糖醛酸含量最高,达17.37%。同时,具有较好的羟自由基,DPPH清除能力,且ABTS清除能力优于TCA法、酶法和Sevage法这三种脱蛋白方式,还原能力优于TCA法、酶法和Na Cl法。2.通过单因素及正交试验对Ca Cl₂-酶复合法脱蛋白工艺条件进行优化得到的最佳脱蛋白工艺为:调p H值为8.0,加热至85℃,加入3%Ca Cl₂,冷却后离心取上清,调p H值为6.0,加入2%酶,50℃酶解2.5 h,沸水灭酶10 min,冷却后离心取上清。在此条件下脱蛋白后,粗多糖中可溶性糖含量从76.5%提高到80.4%,蛋白质含量从2.28%下降到1.26%,降低了44.7%,糖醛酸含量为18.59%。3.以Na Cl作为洗脱液,通过DEAE-52离子交换柱对Ca Cl₂-酶复合法脱蛋白所得银耳多糖进行分离纯化,浓度为0.5 mol/L的洗脱液对多糖的洗脱效果较好,对ABTS和DPPH的清除率最高,羟自由基清除能力及还原能力较好。4.对纯化后银耳多糖进行分子量及单糖组成测定,并进行结构表征。Ca Cl₂-酶复合法脱蛋白所得银耳多糖分子量为5.17×10⁴Da,主要由甘露糖、葡萄糖以及少量半乳糖、葡萄糖醛酸、木糖和阿拉伯糖组成。微观结构显示银耳多糖呈丝状和片状结构,交错缠绕,连接复杂。红外光谱图中存在三种多糖特征峰,且具有糖醛酸和吡喃糖苷结构。5.利用3%DSS诱导雄性Balb/c小鼠发生溃疡性结肠炎,建立溃疡性结肠炎动物实验模型。第6天开始出现便血和体重大幅减轻现象,造模成功。结果表明,银耳多糖可以显著缓解结肠炎小鼠的体重减轻及便血程度。可有效地改善结肠炎的临床症状,其中,结肠长度比模型组增长13.85%,脾脏指数比模型组低11.95%。综上所述,不同脱蛋白方法对银耳多糖影响较大,适于银耳多糖的脱蛋白方式是Ca Cl₂-酶复合法,银耳多糖可以通过增长结肠长度和缓解脾脏肿大等方式减轻溃疡性结肠炎临床症状,保护溃疡性结肠炎小鼠。