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研究背景:牙齿纵折是危害严重的非龋性牙齿疾病之一,失牙率高。粘结再植术是近年来治疗纵折牙的一个突破。研究结果表明,粘结再植术是目前保存纵折牙的有效方法,近期疗效较好,远期牙周疗效与牙周愈合有关。粘结再植术与一般牙再植术不同之处,在于纵折牙粘结再植治疗中,人工合成的粘结材料与牙周组织直接接触。因此粘结材料的使用,成为影响牙周膜细胞生物活性的重要因素之一。合适而性能优异的粘结剂的选择是决定粘结再植术成功与否的重要因素。用于粘接再植术的粘结材料除了对生物相容性有较高的要求外,具备足够的粘结强度,能够满足正常咀嚼过程中后牙所承受的高达0.9~17.6MPa的复杂机械应力,是另一个影响粘接再植术成功与否的重要因素。评价材料的生物及力学性能,检测其对牙周组织的影响,选择生物学性能优异的粘结材料,有助于提高纵折牙粘结再植术的成功率与预后。
研究目的:通过体外对4种粘结材料,即普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBondC&B及SE BOND的生物相容性及其微拉伸粘结强度的研究,评价选择最佳粘结材料,为临床纵折牙粘结再植术提供实验依据。
研究方法:
①应用组织块-酶消化联合培养法体外原代培养HPDLC并传代,免疫组化染色鉴定HPDLC。
②应用CCK-8比色法、琼脂覆盖法、台盼蓝排斥实验、倒置相差显微镜及扫描电镜等方法体外评价4种粘结材料(普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBond C&B及SE BOND)的生物相容性。
③应用微拉伸试验测试上述4种粘结材料粘结纵折牙牙本质的微拉伸强度。
研究结果:
①组织块-酶消化法原代培养HPDLC第10天开始有细胞游出,传代后细胞逐渐成熟,细胞呈梭形或星形,排列成放射状。免疫组织化学染色结果显示,细胞抗波形蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性。
②材料对2种细胞(HPDLC及NIH-3T3细胞)的生物相容性影响结果相似,其中普通型玻璃离子,SuperBond C&B及氢氧化钙无细胞毒性,加强型玻璃离子具极轻微细胞毒性,SE BOND具轻微细胞毒性。
③微拉伸试验显示:普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBond C&B及SE BOND对体外牙本质粘接的微拉伸强度分别为4.99±0.64MPa、6.41±0.93MPa、15.61±1.84MPa及12.84±1.57MPa,各组间微拉伸粘接强度的差异具有统计学意义。
研究结论:
①用组织块-酶消化联合培养法在体外原代培养HPDLC,然后进行传代,能够获得正常的人牙周膜细胞。细胞呈长梭形或星形,核仁清晰,漩涡状排列。免疫组化方法鉴定细胞结果波形丝蛋白阳性、角蛋白阴性,证实培养的细胞为人牙周膜细胞。
②用台盼蓝排斥实验、CCK-8比色实验、琼脂覆盖法及SEM检测4种粘结材料对HPDLC生物性能的影响,发现除SE BOND具有轻微细胞毒性外,其余3种材料均无细胞毒性,4种粘结材料均满足口腔材料临床应用的生物相容性要求。
③用台盼蓝排斥实验、CCK-8比色实验、琼脂覆盖法及SEM检测4种粘结材料对NIH-3T3细胞生物性能的影响所得实验结果与HPDLC实验结果基本一致:4种粘结材料均无细胞毒性,能够满足临床植入型材料对此方面的要求。
④体外牙本质粘结微拉伸实验证实,4种粘结材料的微拉伸粘结强度之间具有显著统计学意义。其中SuperBond C&B的粘接强度最大,其余材料粘接强度由大到小依次为:SE BOND,加强型玻璃离子及普通型玻璃离子。
⑤从4种粘结材料生物相容性和粘结强度两方面综合分析,SuperBond C&B较适合作为纵折牙粘接再植术中的粘结剂。