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目的:本研究通过构建质粒特异性的表达类泛素化修饰物(Small ubiquitin-related modifiers,SUMO),并初步研究SUMO蛋白在原发性胆汁性胆管炎(Primary biliary cholangitis,PBC),系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE),类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA),干燥综合征(Sjogren syndrome,SS)多种典型性自身免疫性疾病患者血清中的表达水平,探究抗SUMO抗体是否可作为PBC的特异性血清标志物。并结合患者临床病历资料,探究SUMO与可溶性酸性磷酸化核蛋白(Acid soluble phosphorylated nuclear protein,Sp100)间的内在联系及对患者肝功能的影响。方法:1.利用PCR和ET克隆技术制备含有SUM01,SUM02,SUM03片段的质粒,将其分别导入大肠杆菌进行蛋白的诱导和表达,最后进行蛋白的纯化。2.采用斑点印迹法初步筛查原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者血清样本中的SUMO阳性标本,并用Western blot进行验证,获取阳性参考血清。通过实验条件的不断改善,建立最适的抗SUMO抗体ELISA诊断体系。3.通过建立的ELISA诊断体系,分别检测抗SUMO抗体3种亚型在PBC,SLE,SS及RA中的阳性率,并通过卡方检验分析其差异性。斑点印迹法和Western blot验证ELISA诊断体系的有效性。4.结合患者临床病历资料,采用t检验对患者的各类生化指标进行统计学分析,发现抗SUMO抗体阳性患者病症上的共性,利于后期研究其致病机制,为其提供针对性的治疗提供依据。结果:1.与其他非PBC自身免疫性疾病和健康对照相比,抗SUMO1抗体,抗SUM02抗体,抗SUM03抗体在PBC中的阳性检出率高(P<0.01)。2.抗SUMO抗体标记物在PBC中的特异性高达99%,其敏感性保持在86%左右。3.抗SUMO抗体在其他自身免疫性疾病人群中的阳性率无明显差异(P>0.05)。4.在抗Sp100抗体阳性与阴性的PBC样本中,抗Sp100抗体阳性组中抗SUMO抗体的阳性率显著高于抗Sp100抗体阴性组(P<0.05),其总胆红素均值和直接胆红素均值较抗SUMO抗体阴性组明显增高(P<0.05)。5.抗SUMO抗体阳性组的非PBC自身免疫性疾病中的胆红素均值较抗SUMO抗体阴性组高。结论:高特异性抗SUMO抗体有望成为PBC诊断的一种新型抗体,对于提高PBC的临床诊断效率意义重大。SUMO蛋白与Sp100联系紧密,其对患者的肝功能具有潜在性的影响。