关于骨骼发育的研究一直是骨科学领域的研究热点,其中“成血管-成骨偶联”的理论是近来新的研究热点与方向。最新研究表明,骨内存在一种高表达CD31和EMCN两种血管内皮细胞特异性抗体的血管,即H型血管。其有选择性地分布在骨内特定区域,并可通过分泌相关因子促进骨形成,使成骨与成血管相互偶联。Corin是一种心脏二型丝氨酸蛋白酶,研究表明其在骨发育尤其是软骨内成骨的过程中发挥了重要的作用。目前暂无文献报道Corin在骨内血管生成,尤其是H型血管的生成方面是否起到作用。研究目的研究蛋白酶Corin对骨内H型血管的形成是否有影响;探索蛋白酶Corin通过何种途径影响了骨内H型血管的形成;研究蛋白酶Corin对骨发育的影响以及在维持骨稳态方面发挥的作用。研究方法1.提取野生型与Corin基因敲除新生小鼠胫骨,用免疫荧光染色以及定量PCR（qRT-PCR）的方法检测H型血管、VEGF及其受体在胫骨干骺端的表达情况;用免疫组织化学染色方法观察两组小鼠胫骨生长板肥大软骨细胞分泌VEGF的情况。2.用阿尔新蓝-茜素红染色方法比较野生型与Corin基因敲除新生小鼠整体骨架大小;比较不同发育阶段的野生型与Corin基因敲除小鼠四肢长骨长度;用定量PCR（qRT-PCR）的方法检测软骨细胞标志性基因在野生型与Corin基因敲除新生小鼠胫骨的表达情况;运用Micro-CT扫描野生型与Corin基因敲除成年公鼠股骨,分析对比两组小鼠骨量及骨小梁结构相关参数。研究结果1.Corin KO新生小鼠胫骨干骺端H型血管数量与WT小鼠相比明显减少。2.Corin KO新生小鼠胫骨干骺端VEGF表达量明显少于WT小鼠;但是两组小鼠胫骨干骺端VEGFR2的表达量无显著差异。3.在WT新生小鼠胫骨生长板肥大软骨细胞区域可见VEGF的表达;在Corin KO新生小鼠胫骨中,VEGF主要表达在生长板增殖期软骨细胞区域,在肥大软骨细胞区域基本无表达。4.Corin KO新生小鼠整体骨架明显小于WT新生小鼠。5.Corin KO新生小鼠四肢长骨长度较WT新生小鼠明显缩短,但是这种长度差异在小鼠成年后却不再明显。6.与WT新生小鼠相比,Corin KO新生小鼠胫骨内Col2a1、IHH和Agc1在mRNA水平的表达量显著降低,Col10a1表达量无显著差异。7.与WT成年公鼠相比,Corin KO小鼠骨密度下降,骨小梁数量减少,分布更稀疏。结论1.蛋白酶Corin通过提高干骺端VEGF的表达从而促进骨内H型血管的形成。2.蛋白酶Corin通过促进生长板内软骨细胞的发育成熟从而促进软骨内成骨这一过程。