【摘 要】
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人参是我国传统的名贵中草药,其主要活性成分人参皂苷具有很高的药用价值。人参口服后,其中的人参二醇类皂苷(PPD)在人体肠道菌的作用下,水解成稀有人参皂苷C-K被人体吸收。
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人参是我国传统的名贵中草药,其主要活性成分人参皂苷具有很高的药用价值。人参口服后,其中的人参二醇类皂苷(PPD)在人体肠道菌的作用下,水解成稀有人参皂苷C-K被人体吸收。稀有人参皂苷C-K的药理活性较高,广泛应用于药品及功能性食品等领域,利用生物转化法将人参二醇类皂苷(PPD)转化为人参皂苷C-K,对人参皂苷C-K的工业化生产具有重要的现实意义。本论文首先研究了人参皂苷酶Ⅰ型酶产酶菌种、培养基及酶反应条件,选择sp.48菌作为最佳的产酶菌株,以槐花作为诱导物,获得酶液用于生产人参皂苷C-K。确定最适反应温度为45℃。在大型反应器中进行大批量的酶反应,底物浓度6%,45℃下反应48 h,C-K的生成率达到80%以上。然后将酶反应产物335 g用AB-8大孔吸附树脂和D-296离子交换树脂进行脱糖、脱色、干燥处理后,得到C-K粗品253 g,得率为75.5%。再将50 g C-K粗品用硅胶柱层析分离,以V(氯仿):V(甲醇)=9:1的混合液洗脱,收集C-K最纯组分16.2 g,得率32.4%,用高效液相色谱进行纯度检测,其纯度为90.8%。取最纯组份的C-K进行结晶,得到13.8 g纯度为98.9%的C-K干燥晶体,得率为85.3%。因此,从酶反应粗品制备纯度为98.9%的C-K标准品的得率为20.8%。最后用核磁共振测其结构,确定其为人参皂苷C-K,即20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20(5)-原人参二醇。
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