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本研究旨在探讨蓝塘与长白猪肠道碱性氨基酸转运载体mRNA表达的发育性变化及其差异，以及营养对肠道碱性氨基酸转运载体基因表达的调控作用，为此，设计了以下试验，比较蓝塘和长白猪生产性能和氨基酸消化率的差异；对猪肠道碱性氨基酸转运载体cDNA序列进行克隆；研究肠道碱性氨基酸转运载体mRNA表达的组织特异性以及其在不同品种猪十二指肠、空肠和回肠表达的发育性变化及差异；研究日粮中添加乳酸菌对猪肠道碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响。
1．试验一，选取2～3胎龄的经产长白母猪15头和蓝塘母猪12头，同期进行纯繁，选取其后代用于试验，即选取90头长白仔猪和70头蓝塘仔猪分别分布到5个重复中，公母混养，统一于28d(平均)断奶，分5阶段进行饲养，即0～35d(乳猪料)，36～60d(保育料)，61～90d(小猪料)，91～120d(中猪料)，121～150d(大猪料)。断奶后以重复为单位进行日采食量的记录，自由饮水，自由采食。60d时，选取蓝塘和长白公猪各5头，进行消化代谢试验，测定其对粗蛋白、能量和氨基酸的消化率及其背最长肌中氨基酸的含量。分别于1、7、26、30、60、90和150d从每个重复选取一头公猪，同一品种体重接近，进行屠宰试验，采集肝脏、脾脏和胰腺，并进行称重，计算脏器指数；采集60d时背最长肌肌肉样；采集十二指肠、空肠、回肠和结肠的样品。用相对定量PCR法进行猪肠道碱性氨基酸转运载体的克隆，并用实时荧光定量PCR(SYBR Green Ⅰ试剂盒)法测定长白猪60d肠道碱性氨基酸转运载体b<0,+>AT，y<+>LAT1、CAT1和CAT2 mRNA表达的组织特异性及蓝塘和长白猪在1、7、26、30、60、90和150d时十二指肠、空肠和回肠mRNA表达的发育性变化，结果如下：
(1)蓝塘和长白猪在其各自的营养水平和相同的饲养环境下，其各项生产性能指标有较大的差异。1d、28d(断奶)和150d时，长白猪平均个体重分别是蓝塘的2.78、1.36和1.73倍；29～150d的料重比，蓝塘比长白高11.38％。两个品种猪肝脏、脾脏和胰腺重量都随体重增加而增加，各脏器指数在60d后，蓝塘比长白要高。
(2)60d时，长白猪对日粮中粗蛋白和能量的表观代谢率比蓝塘分别提高5.52％和7.06％，总氨基酸的表观消化率提高4.05％；背最长肌中16种氨基酸含量总和，长白猪比蓝塘猪高出10.47％，赖氨酸(Lys)含量蓝塘比长白高20.99％。。
(3)首次成功克隆猪肠道碱性氨基酸转运载体b<0,+>AT和y<+>LAT-1 cDNA的部分序列，其长度分别为1118bp和302bp，其基因库登陆序列号分别为EFl27855和EF127856，与人的序列比较，其同源性分别为87.6％和95.7％。
(4)长白猪肠道中b<0,+>AT和y<+>LAT1 mRNA表达的组织特异性有所差异。b<0,+>ATmRNA表达丰度回肠极显著高于十二指肠、空肠和结肠(P<0.01)，结肠最低，y<+>LAT1mRN,A表达丰度十二指肠极显著高于空肠、回肠和结肠(P<0.01)；CAT1和CAT2mRNA表达的组织特异性在肠道近端相似，即从十二指肠、空肠到回肠呈逐渐升高的趋势，CAT1 mRNA结肠的表达丰度显著低于十二指肠、空肠和回肠(P<0.01)，而CAT2 mRNA结肠的表达丰度却显著高于其他三个肠段(P<0.01)。
(5)蓝塘和长白猪肠道碱性氨基酸转运载体b<0,+>AT、y<+>LAT1和CAT1的mRNA分别在十二指肠、空肠和回肠表达的发育性变化规律基本相似，但其表达的高峰期及升降幅度都存在一定的差异；CAT2 mRNA表达的发育性变化规律在不同肠段都存在较大的差异。猪十二指肠b<0,+>AT、y<+>LAT1、CAT1和CAT2 mRNA表达的发育性变化规律差异较大，y<+>LAT1 mRNA表达丰度30d前的各阶段都比30d后的各阶段要低，CAT1和CAT2 mRNA的表达丰度刚好相反，即30d前比30d后要高。猪空肠b<0,+>AT、y<+>LAT1、CAT1和CAT2 mRNA表达的发育性变化趋势差异较大，CAT1 mRNA的表达丰度，1～26d呈递增的趋势，之后开始下降，90d后逐渐回升；CAT2 mRNA的表达丰度，1～60d呈递增的趋势，之后开始下降；b<0,+>AT和y<+>LAT1 mRNA．的表达的发育性变化规律不明显。蓝塘猪回肠b<0,+>AT mRNA表达丰度在7～30d呈递减的趋势，之后又呈递增的趋势，蓝塘和长白猪在26～150d时b<0,+>AT mRNA表达的变化趋势一致；y<+>LAT1和CAT1 mRNA在回肠表达的发育性变化规律相似，即在1～60d呈递增的趋势，之后呈递减的趋势。
试验一结果表明，长白猪的生产性能、氨基酸消化率和60d背最长肌中氨基酸含量的总和都高于蓝塘猪。两品种猪肠道碱性氨基酸转运载体的发育性变化有差异。
2．试验二，选用体重(58kg)相近的长大二元杂交阉公猪54头，随机分成2个处理，每个处理3个重复，每个重复9头，对照组饲喂常规日粮，试验组饲喂用乳酸菌发酵处理的常规日粮。两组饲粮营养水平一致。预饲期7天，试验期45天，于试验结束当天分别从每个重复中选取体重接近的2头进行屠宰，采集十二指肠、空肠和回肠组织样，用实时荧光定量PCR方法测定两组猪不同肠段b<0,+>AT、y<+>LAT、CAT1、CAT2 mRNA表达的相对丰度。结果如下：乳酸菌对十二指肠和空肠中b<0,+>AT、y<+>LAT1、CAT1和CAT2 mRNA表达丰度都有提高的趋势，且对空肠中b<0,+>AT和十二指肠中y<+>LAT1 mRNA的表达达到显著水平(P<0.05)；对回肠中y<+>LAT1和CAT1 mRNA的表达丰度有提高的趋势，对回肠b<0,+>AT和CAT2 mRNA的表达丰度有下降的趋势，但差异都不显著(P>0.05)。
试验二表明，乳酸菌有上调十二指肠和空肠中碱性氨基酸转运载体和回肠中部分碱性氨基酸转运载体mRNA的表达的趋势，从而达到提高肠粘膜细胞对氨基酸的吸收转运能力。