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细胞内抗体(Intracellular antibodies,Intrabodies)是近年发展起来的一种在细胞内表达特异性抗体,以达到结合及灭活细胞内靶分子,干扰细胞内代谢的生理、生化过程。该技术在灭活肿瘤细胞癌蛋白、抑制细胞内病毒繁殖等研究领域取得了令人鼓舞的结果。肿瘤细胞内抗体研究中多采用抗癌基因蛋白的抗体,未见有关在肝癌细胞内表达抗肝癌抗体的报道。 本研究将本实验室构建的抗人肝癌单链抗体(scFv)克隆入逆转录病毒载体PDOR,构建了真核表达载体PDORscFv。用脂质体(LipofectaMine)转染法将PDORscFv转入培养的人肝癌细胞系HCC9204细胞中。G418筛选及有限稀释法得到阳性细胞克隆。原位PCR分析、RNA打点杂交及免疫组织化学分析证明抗人肝癌