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目的:观察清热活血方对胶原诱导型关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠炎症环境及RNA甲基化m6A修饰酶METTL3的影响,通过分析其内在机制,为清热活血方在临床治疗活动性类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）提供科学依据。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、中药组（清热活血方）、西药组（MTX）、中西药组（清热活血方+MTX）,采用Ⅱ型胶原乳化剂造模,在大鼠尾根部一侧皮下注射0.2ml/只,一周后加强免疫,于大鼠尾根部另一侧皮下注射0.15ml/只,建立CIA大鼠模型。免疫当天开始灌胃给药,连续28天,正常组和模型组给予等量的生理盐水。病理形态学观察:在给药过程中观察并记录各组大鼠的活动情况及行为改变、体重变化、关节肿胀度等;检测大鼠后肢膝关节滑膜病理及踝关节病理,观察炎症、细胞形态、骨侵蚀等情况;体内指标检测:用ELISA法检测各组大鼠血清中抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）、白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素17（IL-17）的表达;用RT-PCR法检测各组大鼠踝关节及腹主动脉血中白细胞中METTL3mRNA的表达;用Western Blot法检测METTL3蛋白的表达,初步观察清热活血方对CIA大鼠炎症环境及RNA甲基化m6A修饰酶METTL3的影响。结果:1清热活血方对CIA大鼠炎症环境的影响足趾肿胀度结果显示:首次免疫后第10天开始,各造模组大鼠四肢开始出现红肿,且不同程度的增加,在第22天的时候达到峰值。从免疫后第10天开始到第28天,与正常组相比,模型组肿胀度明显增加（P<0.05）,足趾容积一直居高不退,在第24天的时候肿势开始减轻,说明RA具有一定程度的自限性。与模型组相比,中药组、西药组、中西药组在首次免疫后第一天开始给药,肿势上升较慢,且坡度平缓（P<0.05）,说明清热活血方、MTX既可治疗性的降低RA的肿胀程度,又可预防性的延缓RA的进程。体重结果显示:免疫后第1天至第28天,各组大鼠体重均有所增长,与正常组相比,模型组大鼠体重增长缓慢（P<0.05）,在免疫后第18天,正常组大鼠体重为362.1±22.01g（n=10）,模型组大鼠体重为346±34.27g（n=10）,两组差别有统计学意义（P<0.05）。中药组大鼠体重为361.3±20.41 g（n=10）,西药组大鼠体重为364±12.16 g（n=10）,与模型组比较,清热活血方和MTX可促进CIA大鼠体重的增加,缓解RA病程（P<0.05）。滑膜组织HE染色病理结果显示:正常组大鼠滑膜细胞排列整齐,无增生,滑膜细胞形态正常。与正常组相比,模型组大鼠滑膜组织表现出滑膜细胞排列紊乱,粗糙,结构异常,并有大量炎性细胞浸润。与模型组相比,中药组、西药组、中西药组存在少部分形态结构异常、排列紊乱的滑膜细胞,大部分仍处于正常状态,炎性细胞有浸润,但明显较少。滑膜组织HE染色病理结果显示:正常组关节面连续、平滑,完整,骨小梁结构紧密,关节间隙正常,未发现有炎性细胞。与正常组相比,模型组关节面粗糙,有不连续的小突起,骨小梁与近关节面骨端破坏,骨质疏松,有大量炎性细胞浸润。与模型组相较,中药组、西药组、中西药组关节面基本完整,骨小梁破坏较轻,骨质疏松较轻,炎性细胞浸润较少。炎症因子结果显示:与正常组相较,模型组血清中抗CCP抗体、IL-17含量显著升高,IL-10的含量明显下降（P<0.01）,与模型组比较,中药组、西药组、中西药组能不同程度的降低CIA大鼠血清中抗CCP抗体和IL-17的含量,升高IL-10的含量（P<0.05）,且三个治疗组间无统计学意义（P>0.05）。2清热活血方对CIA大鼠淋巴细胞中METTL3mRNA转录水平以及踝关节METTL3蛋白表达的影响各组CIA大鼠给药28天后,采用RT-PCR法检测大鼠淋巴细胞中METTL3mRNA的转录水平,模型组相较正常组,METTL3mRNA表达量显著升高（P<0.05）。与模型组相较,中药组、西药组、中西药组治疗后均可不同程度降低METTL3mRNA的表达（P<0.05）,但三个治疗组间无统计学意义（P>0.05）。各组CIA大鼠给药28天后,采用Western Blotting法检测大鼠踝关节中METTL3蛋白的表达。模型组相较正常组,METTL3的蛋白表达量显著升高（P<0.05）。与模型组相较,中药组经清热活血方治疗后可降低METTL3蛋白的表达（P<0.05）,西药组、中西药组均可降低METTL3蛋白的表达（P<0.05）,以中西药组对METTL3蛋白表达量的抑制最为显著,三个治疗组间无统计学意义（P>0.05）。结论:1.清热活血方可减轻CIA大鼠关节红肿症状,降低关节肿胀度,促进体重增加;保护滑膜细胞正常形态,减轻炎性细胞浸润,减少血管翳增生;延缓踝关节骨质破坏和炎症。在炎症指标中,清热活血方灌胃可降低CIA大鼠血清中抗CCP抗体、IL-17的含量,上调IL-10的含量,改善炎症环境。2.清热活血方可降低CIA大鼠腹主动脉血白细胞中METTL3mRNA的含量,同时降低CIA大鼠踝关节METTL3蛋白水平。