【摘 要】
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文殊兰(Crinum asiaticumL.Var.sincum.Bak)为石蒜科白花文殊兰属(Crinum)多年生草本植物,广泛分布于热带、亚热带及温带地区,喜生在海滨及河边沙地等地区。此外在我国华南地
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文殊兰(Crinum asiaticumL.Var.sincum.Bak)为石蒜科白花文殊兰属(Crinum)多年生草本植物,广泛分布于热带、亚热带及温带地区,喜生在海滨及河边沙地等地区。此外在我国华南地区、热带及亚热带地区均有培植。文殊兰含有丰富的生物碱类物质。最初民间常以文殊兰叶和根状茎入药,具有清火解毒、散瘀消肿的功效,并且有报道称,文殊兰鳞茎提取物对人的肺癌细胞、肠癌细胞以及白血病细胞等均具有较好的抑制活性,但对文殊兰种子的报道少之又少。前期发现文殊兰叶提取物具有抗肿瘤活性,对人肺癌细胞(A549)、肠癌细胞(LOVO)、T细胞白血病细胞等均具有良好的生长活性抑制作用;而其氯仿提取物更是具有明显的抗肿瘤作用,可以抑制肿瘤细胞NCI-H460的增殖,同时诱导NCI-H460细胞的凋亡,并在细胞周期G1/S期产生阻滞。本实验对文殊兰种子醇提物的化学活性成分进行研究,经过提取分离纯化中强碱性生物碱,为文殊兰的进一步研发和临床应用提供重要的理论指导和实验依据。本试验首先对文殊兰生物碱的乙醇提取工艺进行了优化,对乙醇浓度、提取温度以及提取时间等因素进行了单因素考察,并依据单因素考察结果设计正交实验,从而优化了文殊兰生物碱的最佳提取工艺,即乙醇浓度为85%、提取温度为65℃、提取时间为3h。依据筛选的实验条件对文殊兰生物碱进行了提取。并对提得的文殊兰总碱浸膏进行处理,通过调节pH=7~8来分离中强碱性生物碱。将中强碱性生物碱的浸膏通过硅胶柱色谱进行分离,对各馏分收集,再将各馏分用SPE小柱处理纯化后进行分析,对液相条件进行了筛选,确定了流动相为甲醇-水(90:10~0:100)梯度洗脱及吸收波长为290nm等,并进行了方法学考察,以相对保留时间与相对峰面积为指标,计算其RSD值均小于3%,结果表明其精密度、稳定性以及重现性效果良好,进而对各馏分进行了质谱检测,结合工具书及谱图库的对照对其结构进行推测,推测出可能存在的5个化合物的结构,分别为Uridine、君子兰宁碱(Hippeastrine)、Lycorenan、文殊兰亭碱(Crinasiatine)、多花水仙碱(Tazettine)。
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