水浮莲(Pistia stratiotes L.)内生菌的分离及农作物致病菌拮抗菌株的筛选与鉴定

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本文通过表面消毒和碾碎法从水浮莲(Pistia stratiotes L.)中共分离获得72株内生菌。根据形态学观察初步确定为61株细菌、9株放线菌和2株真菌。根据形态学观察、培养特征和生理生化试验,将9株放线菌初步鉴定为诺卡氏菌属,链孢囊菌属和游动放线菌属。采用琼脂扩散法进行拮抗实验,筛选出3株拮抗菌——XJPL-YB-23、XJPL-YB-26和XJPL-YB-50分别对苹果斑点落叶病菌、西瓜枯萎病菌和玉米小斑病菌有拮抗能力。依据形态特征、生理生化检测、16S rDNA和G+Cmo1%,最终将3株拮抗菌鉴定为枯草芽孢杆菌。生物学特性实验表明,XJPL-YB-23和XJPL-YB-2NaCl%生长范围均为0%-10%,最适NaCl%分别为2%和0%;pH生长范围分别为5-10和6-10,最适pH值分别为6和8。敏感性实验结果显示,XJPL-YB-26的发酵液对高温和氯仿部分敏感,而对高温高压极其敏感,经高温高压处理后无拮抗作用;XJPL-YB-50经高温高压处理20min后仍然有抑菌圈。这初步证明,XJPL-YB-26的拮抗物质为有机活性成分。同时UV-光谱显示,XJPL-YB-26的发酵液上清在280nm处有最大吸收峰,表明其拮抗成分为蛋白类物质,具体的成分尚待进一步研究证明。在西瓜活体植物上的检测结果表明,XJPL-YB-26对西瓜枯萎病菌的确有抑制作用,这为进一步的研究其拮抗机制提供了很好的实验材料。
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