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目的:探讨VX2细胞株制作兔移植性肝癌模型的种植方式,建立兔VX2移植性肝癌模型,并分析该肿瘤的生长特性。评价经肝动脉内注射32P与碘化油乳剂对兔VX2肝癌动物模型的治疗效果,并与单纯注射碘化油组及单纯注射32P胶体组对比,观察各组血细胞术前后计数及肝功指标变化。
方法:1.模型建立:实验对象为新西兰大白兔30只,第一步将VX2肝种植癌模型种兔(荷VX2瘤新西兰种兔)传代,将惠赠的VX2肿瘤株种植于种兔下肢腿部外侧,两周后待种兔种植包块达1cm后可获取肿瘤组织块。第二步将获取的VX2瘤块组织用眼科剪将其剪至1mm3的小块,采取开腹方式接种于肝脏。第三步影像学监测肿瘤生长:接种后10-14天行CT及MRI扫描,并行切开暴露股动脉插管,作DSA造影,观察肿瘤生长情况及生物学特征;2.把30只荷肿瘤兔随机分为三组进行肝动脉插管介入治疗,第1组单纯注射32P胶体,第2组注入碘化油与造影剂混合乳剂,第3组注入放射性核素32P与碘化油乳剂。药物的配制:第1组,抽取放射性核素32P胶体1ml与3ml生理盐水混合。未曾稀释的32P胶体放射性浓度为2mci/ml,混合后浓度为0.5mci/ml。第2组,抽取碘化油1-2ml经微导管缓慢注入,注入碘化油量可根据术中情况适当增减。第3组,抽取放射性核素32P胶体1ml与碘化油3ml混合震荡成均匀乳剂,放射性为0.5mci/ml。药物注射量:第1组和第3组根据肿瘤大小,按0.5mci/cm3注射药物;3.采血化验:各组均在治疗前、治疗后3天、7天作血细胞计数及肝功指标检查;4.CT监测:各组试验兔均在治疗前行CT平扫检查,并于治疗后7及14天再作CT检查,观察肿瘤缩小情况;5.治疗两周后对各组试验兔处死,取肿瘤组织制作病理切片,观察其治疗效果。
结果:1.肿瘤种植成功率为100%,接种后10-14天行cT及MRI扫描,可明显观察到肿瘤生长,14天左右,种植瘤直径可达到2cm大小。DSA造影可显示肿瘤有供血动脉,多数血供丰富;2.第3组动脉注入放射性核素32P与碘化油乳剂组肿瘤缩小明显,病理切片上组织学表现为肿瘤细胞弥漫性坏死,肿瘤坏死范围大,坏死率高;3.血细胞计数治疗前后三组无显著差别,三组治疗方式对外周血红细胞和白细胞计数无明显抑制作用;4.肝功指标:三组转氨酶及胆红素指标治疗前后变化以单纯注射32P胶体指标升高明显,与其他两组比较有显著意义,32P与碘化油乳剂组比单纯碘化油组略高,统计学无显著意义。
结论:移植性兔VX2肝癌是介入治疗实验研究较为理想的动物模型,综合影像评价有利于实验动物的筛选。采用开腹VX2瘤块组织直接楔入种植于肝脏成功率高,影像学追踪监测显示肿瘤生长类似于原发性肝癌,是一种值得推广的介入治疗实验研究动物模型建立方法。32P碘化油乳剂提高了肿瘤局部放射性核素的浓度,使肿瘤局部照射剂量提高,同时减低了正常组织的照射剂量,实验证明经肝动脉超选择注射放射性核素32P与碘化油乳剂治疗兔VX2肝癌安全、有效。