【摘 要】
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目的:本实验通过制备抗HER-2/neu独特型单克隆抗体,对其进行生物学性质的体外验证,进而验证其对HER-2/neu抗原的生物学模拟作用,探讨抗独特型疫苗在抗肿瘤治疗中的价值与优势
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目的:本实验通过制备抗HER-2/neu独特型单克隆抗体,对其进行生物学性质的体外验证,进而验证其对HER-2/neu抗原的生物学模拟作用,探讨抗独特型疫苗在抗肿瘤治疗中的价值与优势。
方法:以抗HER-2/neu单抗为抗原阶段性免疫近交系BALB/c小鼠,通过细胞融合、HAT(次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶核苷)培养基筛选的方法获得杂交瘤细胞,通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)验证出分泌目的抗体的细胞群。以有限稀释的方法从该阳性细胞群中获取分泌目的抗体的单克隆杂交瘤细胞株。同系BALB/c小鼠腹腔种植单克隆杂交瘤细胞,阶段性收获腹水,通过间接酶联免疫吸附试验、western blot和细胞免疫荧光方法验证腹水中抗独特型抗体的结合位点。以该抗独特型抗体阶段性免疫同系BALB/c小鼠,通过细胞免疫荧光实验检测该制备抗体所预备的免疫原性。
结果:制备了特异性较好的抗HER-2/neu独特型单克隆抗体,该抗体模拟了HER-2/neu抗原表位,具有一定的免疫原性。
结论:抗HER-2/neu独特型单克隆抗体可以通过杂交瘤技术持续、稳定、大量的获得。该抗体具有抗原内影像的生物学作用,体内、外均可较好的模拟HER-2/neu抗原,有望通过诱导主动免疫为HER-2/neu阳性的恶性肿瘤患者的免疫治疗提供新的疫苗。
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