为了研究Ⅰ型聚酮合成酶特别是硫酯酶在链霉菌中acyltetramic acid类抗生素合成中的作用,以利迪链霉菌为例,改进PCR方法,运用基因阻断技术和LC/MS分析方法,试图从分子水平研究Ⅰ型聚酮合成酶中的酮酰基合成酶、硫酯酶以及抗生素合成基因簇中的修饰酶S-腺苷蛋氨酸合成酶和细胞色素P450在利迪链菌素生物合成中的作用.运用FTIR技术测定发酵培养后的菌体,红外数据用PCA、HCA和ANN分析,试图找到利迪链霉菌开始合成利迪链菌素时的biomarker,以及用于突变株高通量筛选的方法.获得如下主要结果: 针对链霉菌基因组DNA高GC含量的特点,改进了PCR体系.用改进的PCR体系克隆得到了硫酯酶Ⅱ、3-氧酰基-ACP合成酶Ⅱ、S-腺苷蛋氨酸合成酶以及细胞色素P450的基因片段,并确定3-氧酰基-ACP合成酶Ⅱ、硫酯酶Ⅱ和S-腺苷蛋氨酸合成酶参与了利迪链菌素的生物合成,而扩增得到细胞色素P450对利迪链菌素的合成没有直接影响.同时发现,链霉菌中acyltetramic acid类抗生素利迪链菌素的生物合成需要硫酯酶,不同于目前在真菌中发现的2种同类抗生素equisetin和fusarin C的生物合成. 发酵培养基中添加L-蛋氨酸,L-赖氨酸,L-精氨酸、L-异亮氨酸和L-色氨酸,引起菌体细胞内S-腺苷蛋氨酸含量的下降,导致利迪链菌素含量的下降,其中以蛋氨酸和精氨酸的效果最为显著.S-腺苷蛋氨酸可以提高利迪链菌素的产量,表明L-蛋氨酸不是利迪链菌素生物合成的直接前体,而主要是通过合成S-腺苷蛋氨酸,提供利迪链菌素结构中的N-甲基.H<,2>O<,2>通过诱导蛋白的表达,改变了菌体的正常代谢途径,降低了利迪链菌素的产量并积累了其他物质. 运用FTIR技术结合PCA、HCA,很好地区分了处于不同发酵时间的利迪链霉菌AS 4.2501,并找到了利迪链霉菌合成利迪链菌素时可能的生物标志物(biomarkers)；尝试用FTIR技术结合ANN较好地预测了具有不同利迪链菌素合成能力的利迪链霉菌的突变株.表明基于代谢物组分析的FTIR技术与ANN的结合,有望用于菌株诱变后的高通量筛选.