香芹酚对骨肉瘤的抑制作用及相关分子机制的实验研究

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背景:香芹酚是一种提取自传统中药牛至、百里香等药材的单萜类单体,目前香芹酚已被广泛得应用于中枢神经系统疾病、肝脏疾病、消化系统肿瘤等许多疾病的研究。骨肉瘤是一种恶性程度很高的疾病,目前缺乏新的治疗手段。目的:香芹酚对于骨肉瘤的作用及其具体机制目前尚不清楚,我们在本研究中试图阐明香芹酚对骨肉瘤的抗肿瘤作用及相关的分子机制。方法:我们在本研究中利用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)实验及克隆集落形成实验检验香芹酚对骨肉瘤的增殖能力。利用流式细胞术及hoechst染色实验检测香芹酚对骨肉瘤细胞凋亡的影响。利用划痕实验及transwell实验检测香芹酚对骨肉瘤迁移和侵袭能力的影响。利用蛋白免疫印迹(Western Blotting,WB)实验检测蛋白的表达情况。利用裸鼠移植瘤模型、免疫组织化学、苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin Staining,HE)染色验证香芹酚对骨肉瘤的体内作用。结果:我们发现香芹酚处理可以降低骨肉瘤细胞系143B和U2OS细胞株的细胞活性及克隆集落形成,具有一定的浓度依赖性。香芹酚处理后凋亡细胞的数目增加,另外抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)的降低和促凋亡蛋白Bcl-2相关因子X(Bcl-2-associated X protein,Bax)表达增加。我们发现基质金属蛋白酶9(Matrix metallopeptidase 9,MMP-9)蛋白的表达以及143B、U2OS细胞株迁移和侵袭能力受到香芹酚作用的抑制。我们发现香芹酚对骨肉瘤的作用与Wnt/β-catenin信号通路有关。结论:我们的研究发现香芹酚可以抑制骨肉瘤的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,其抗肿瘤作用可能与调节Wnt/β-catenin信号通路有关。
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