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目的： 1.分离小鼠骨髓细胞，体外诱导培养为树突状细胞(DCs)。 2.研究体外负载HBcAg和HBeAg对小鼠骨髓源性肝DCs功能的影响，分析其可能机制。 方法： 1.分离C57BL/6小鼠骨髓细胞，用rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导为树突状细胞(DCs)。 2.利用磁珠分选系统纯化DCs，流式细胞术检测纯化DCs纯度。 3.按照干预条件，将纯化DCs分为对照组、HBcAg组和HBeAg组。CCK-8法检测DCs在混合淋巴细胞反应(MLR)中刺激T淋巴细胞增殖的能力，酶联免疫法(ELISA)检测DCs培养上清中IL-12、IL-10和IDO的分泌水平，蛋白免疫印迹(Western blot)检测DCs中Akt的磷酸化水平。同时，设置LY294002组为阳性对照探讨细胞因子分泌的可能调节机制。 结果： 1.成功分离获得C57BL/6小鼠骨髓细胞，体外用rmGM-CSF和rmIL-4诱导为小鼠骨髓源性DCs，可见贴壁细胞逐渐悬浮和半贴壁，并呈细胞积聚现象，形态不规则呈树突样突起。收集第6天时的悬浮和半贴壁细胞，经CD11c+磁珠分选系统纯化后，流式细胞术检测DCs纯度达90％以上，满足进一步实验要求。 2.HBcAg组上清液中IL-12水平以及DCs刺激淋巴细胞增殖能力较对照组明显升高（P＜0.01）。HBeAg组上清液中IL-12水平以及DCs刺激淋巴细胞增殖能力较对照组明显降低（P＜0.05），而IL-10和吲哚胺2，3-双加氧化酶(IDO)的水平较对照组明显升高（P＜0.01）。HBeAg组Akt的磷酸化水平较对照组明显升高(P＜0.05)。LY294002组Akt的磷酸化水平较HBeAg组明显降低（P＜0.05），并且上清液中IL-12水平较HBeAg组明显升高(P＜0.01)，IL-10和IDO的分泌水平较HBeAg组明显降低(P＜0.01)。 结论： 1.HBcA能够促进小鼠骨髓源性DCs分泌IL-12，增强其刺激T淋巴细胞增殖能力。 2.HBeAg可以明显抑制小鼠骨髓源性DCs的Th1型细胞因子(IL-12)的产生，促进Th2型细胞因子(IL-10)的分泌，导致Th1/Th2型细胞因子失衡，并减弱其刺激T淋巴细胞增殖能力。 3.HBeAg刺激的小鼠骨髓源性DCs分泌高水平的IDO。该DCs可能具备一定调节性DCs的免疫调节功能。 4.HBeAg可能通过影响DCs中的PI3K-Akt信号通路调节DCs细胞因子IL-12、IL-10及IDO的分泌。