当药中獐牙菜苦苷的提取分离及稳定性研究

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当药为龙胆科植物瘤毛獐牙菜Sertia pseudochinensis Hara的干燥全草,是一种常用的民间草药。具有消湿热、健胃及清肝利胆的功效,主要用于泻火解毒、利湿、健脾。对湿热黄疸、痢疾、胃炎、消化不良和疮毒肿痛等症作用较大。当药中含有多种化学成分,主要包括环烯醚萜类(獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、当药苷等)、三萜类(齐墩果酸、齐墩果烷、熊果酸等)、黄酮类(当药黄素、芒果苷及口山酮类)等。其中獐牙菜苦苷为其主要有效成分。獐牙菜苦苷属于裂环环烯醚萜类物质,化学稳定性差,遇酸、碱、羰基化合物和氨基酸都易变色,造成当药质量的不稳定,但是目前对獐牙菜苦苷稳定性的研究甚少。本文对当药活性成分獐牙菜苦苷的提取、分离、纯化的方法以及獐牙菜苦苷单体、当药提取物和当药药材的稳定性进行了研究,为其临床应用提供实验依据。1)利用硅胶色谱柱、反相硅胶色谱柱等从当药药材中分离得到獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和当药醇苷三种化合物,采用核磁共振氢谱和碳谱数据并参考文献数据确定了三种化合物的结构。利用薄层色谱法和高效液相色谱法测定三种化合物色谱纯度分别为99.68%、97.79%、98.63%。2)利用液相色谱-质谱联用技术对獐牙菜苦苷单体、当药提取物和当药药材在室温(温度25℃湿度60%)、温度(60℃、40℃)、高湿(相对湿度75%±5%和相对湿度90%±5%)、高温高湿(温度40℃湿度90%以及温度60℃湿度90%)、光照(25℃,5000lux)以及不同酸碱度(p H=1、p H=4、p H=7、p H=9、p H=11、p H=13)条件下的降解情况进行了研究。结果表明,温度、湿度、光照及不同酸碱度等因素对獐牙菜苦苷的稳定性均有不同程度的影响,高温、高湿以及光照条件下獐牙菜苦苷的降解速率为v当药药材>v当药提取物>v獐牙菜苦苷单体;高温高湿条件下獐牙菜苦苷的降解速率为v獐牙菜苦苷单体>v当药提取物≈v当药药材;不同酸碱度条件下獐牙菜苦苷的降解速率为vp H=13>vp H=1>vp H=11>vp H=4>v p H=9>vp H=7。当药药材、当药提取物和獐牙菜苦苷应在阴凉干燥、中性环境中保存,避免高温、高湿、酸性条件、碱性条件及长期强光照射。3)利用液相色谱-质谱联用技术对獐牙菜苦苷降解产物及降解途径进行了分析研究。通过UPLC-Q-TOF-MS数据获得獐牙菜苦苷及其降解产物的准确分子质量数和分子组成,初步推断其降解产物可能的分子结构和降解途径。
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