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研究目的为对阿齐沙坦酯片在中国人体内临床研究提供科学依据,本研究对阿齐沙坦酯片与阿奇沙坦片人体内比较药代动力学研究进行了评价。本研究基于LC-MS/MS技术,建立适用于检测人血浆中阿齐沙坦、及其代谢产物M1和M2的LC-MS/MS分析方法,并准确测定人血浆中阿齐沙坦、M1及M2的浓度,计算其相应的药物代谢动力学参数,并对药物代谢动力学参数进行分析,以此对两种药物比较药代动力学研究进行相关评价。研究方案建立适用于检测人血浆中阿齐沙坦、M1及M2的LC-MS/MS分析方法。质谱方法:电喷雾离子源,正离子扫描模式,多重反应监测,相应定量离子对分别为阿齐沙坦 m/z 457.3-→m/z 233.1,M1 m/z 415.3→m/z 192.1,M2 m/z 429.3-→m/z 251.1,MK0431 m/z 408.3-→m/z 235.1。液相方法:Agilent Eclipse Plus C18(2.1×50 mm I.D.,5 μm),流动相为甲醇、5 mM乙酸铵,采用梯度洗脱方式,流速为0.4 mL/min;柱温箱温度设定为40℃,分析时间控制在4.0 min。采用蛋白沉淀样品前处理方法,血浆样用甲醇沉淀后,上清用甲醇-水(50:50,v/v)稀释后用于检测。本方法按照国家食品药品监督管理局(China Food and Drug Administration,CFDA)指导原则要求,分别从线性范围、最低定量下限、专属性、精密度、准确度、提取回收率、基质效应和样品稳定性等方面进行完全方法确证。利用所建立的LC-MS/MS定量分析方法分别测定了测定人血浆中阿齐沙坦、M1及M2的浓度,并且绘制了药物浓度-时间曲线。根据药物浓度-时间数据求出相关药物代谢动力学参数(达峰浓度Cmax、达峰时间Tmx、消除半衰期t1/2、药-时曲线下面积AUC0-∞等),并对上述药物代谢动力学参数进行相关分析,用于对对比药代研究的药物代谢动力学过程进行相关评价。研究结果本研究建立了检测人血浆阿齐沙坦、M1及M2的LC-MS/MS分析方法,该方法优点如下,待测物阿齐沙坦、M1及M2和内标磷酸西他列汀(MK0431)的检测不会受到内源性物质干扰;待测物在分析批内和批间的准确度和精密度均满足分析测试要求;样品处理方法表现出平行且高的提取回收率;待测物阿齐沙坦、M1及M2和内标MK0431的检测不被基质效应的影响;阿齐沙坦、M1及M2稳定性试验结果表明生物样品储存、运输、分析过程中能够保持稳定以保证分析结果准确可靠。本方法符合CFDA指导原则要求,能够满足临床药物代谢动力学研究的要求,可用于阿齐沙坦酯片和阿齐沙坦片药物代谢动力学的相关研究。结果表明,与受试者口服阿齐沙坦片相比,受试者口服阿齐沙坦酯片后,血浆中阿齐沙坦和M2的AUC0-t、AUC0-∞、Cmax均提高30%左右。以上结果表明,与阿齐沙坦相比,前药阿齐沙坦酯片能够提高其在人体内的吸收程度,达到增加生物利用度的目的。