【摘 要】
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该文利用法夫酵母合成虾青素,对酵母菌株的诱变选育、法夫酵母与红曲的混合培养以提高虾青素产量的生产工艺和虾青素的分离进行了研究.首先考察了逆流色谱对虾青素的分离情况
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该文利用法夫酵母合成虾青素,对酵母菌株的诱变选育、法夫酵母与红曲的混合培养以提高虾青素产量的生产工艺和虾青素的分离进行了研究.首先考察了逆流色谱对虾青素的分离情况以及优化了HPLC检测方法;接着研究了法夫酵母的诱变选育,以亚硝基胍为诱变剂,二苯胺、抗霉素A,β-紫罗酮为筛子,筛选虾青素高产菌株,经过两次诱变筛选,得到菌株N2-β-A-03,其类胡萝卜素比出发菌株N-03的提高了47.51％;N2-β-A-03菌株再经过NTG诱变与洛伐他汀筛选,得到高产菌株NPX-3_05,其虾青素产量与胞内含量分别是菌株N2-β-A-03的2.43倍、1.60倍;但虾青素比率稍有下降,从出发株的78.05％减至72.06％.在摇瓶水平上,考察了培养条件与培养基对混合培养过程中法夫酵母合成虾青素的影响,包括摇瓶装液量,摇瓶搅拌速率,碳源浓度的优化,氮源的选择及其浓度的优化,不同盐浓度的影响,磷酸盐浓度与硫酸镁浓度的选择等.最终较优的发酵水平为500ml摇瓶装液量为60ml,摇瓶转速为210rpm;优化培养基为:大米粉80g/1,酵母膏1.0g/1,硫酸胺1.0g/1,磷酸二氢钾1.5g/1,硫酸镁1.0g/l;而后在通气搅拌罐中考察了间歇发酵条件对虾青素合成的影响,由于混合培养中法夫酵母的生长与虾青素的形成对发酵条件较为敏感,发酵过程中需保持合适的通气量与搅拌速率,通过一系列实验,得出较佳的发酵参数为:通气量2.4vvm,搅拌转速为350rpm,在此条件下,2.5L培养基中虾青素总产量为30.57mg.
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