针康法对脑缺血大鼠肠道菌群结构及内毒素、二胺氧化酶、5-羟色胺表达的影响

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目的观察针康法对局灶性脑缺血大鼠肠道菌群、肠道黏膜屏障、缺血半暗区脑组织5-羟色胺(5-HT)表达及预后的影响。方法将90只雄性Sprague-Dawley大鼠随机等分为假手术组、模型组、针刺组、康复组和针康组,每组再等分为3d、7d和14d三个亚组,每个亚组6只。除假手术组外,其余四组采用改良Koizumi线栓法制备永久性脑缺血模型。假手术组和模型组不予治疗,针刺组予头穴丛刺治疗,康复组予跑台康复训练,针康组同时予以上两种治疗。术后14d采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组大鼠肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌)变化。预定时间点用改良神经功能缺损评分(m NSS)检测各组大鼠神经功能缺损情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肠道黏膜屏障指标血清中内毒素(lipopolysaccharide-binding protein,LPS)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测缺血半暗区脑组织中5-HT的表达。结果1.改良神经功能缺损评分(m NSS):术后3d,7d,14d模型组与假手术组相比较,m NSS评分升高(P<0.05);各治疗组与模型组相比较,m NSS评分降低(P<0.05);术后7d和14d,针康组与针刺治疗组和康复治疗组相比较,m NSS评分均显著下降(P<0.05)。2.目标菌种数量:术后14d,模型组与假手术组相比较,乳酸杆菌和双歧杆菌的数量降低,大肠杆菌和肠球菌的数量上升(P<0.05);各治疗组与模型组相比较,乳酸杆菌和双歧杆菌的数量均上升,大肠杆菌和肠球菌的数量均降低(P<0.05);针康组与针刺治疗组和康复治疗组相比较,乳酸杆菌和双歧杆菌的数量显著升高,大肠杆菌和肠球菌的数量均显著降低(P<0.05)。3.肠粘膜屏障指标(血清LPS、血清DAO):血清LPS含量:术后3d,7d,14d模型组与假手术组相比较,血清LPS含量升高(P<0.05);各治疗组与模型组相比较,血清LPS含量降低(P<0.05);术后7d和14d,针康组与针刺治疗组和康复治疗组相比较,血清LPS含量均显著降低(P<0.05)。血清DAO含量:术后3d,7d,14d模型组与假手术组相比较,血清DAO含量升高(P<0.05);各治疗组与模型组相比较,血清DAO含量降低(P<0.05);术后7d和14d,针康组与针刺治疗组和康复治疗组相比较,血清DAO含量均显著降低(P<0.05)。4.脑组织5-HT含量:术后3d,7d,14d模型组与假手术组相比较,脑组织5-HT含量降低(P<0.05);各治疗组与模型组相比较,脑组织5-HT含量升高(P<0.05);术后3d,7d,14d,针康组与针刺治疗组和康复治疗组相比较,脑组织5-HT含量均显著升高(P<0.05)。结论1.针康法可降低脑缺血大鼠神经功能缺损评分,促进神经功能恢复。2.针康法可增加脑缺血大鼠肠道内乳酸杆菌和双歧杆菌的数量,减少大肠杆菌和肠球菌的数量,优化肠道菌群结构。3.针康法可降低脑缺血大鼠血清内毒素和二胺氧化酶的含量,促进肠粘膜损伤的修复。4.针康法可提高脑缺血大鼠脑组织5-羟色胺的含量,促进受损组织和神经元的恢复。
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