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桦木醇是一种在桦木属植物外皮中大量存在的羽扇豆烷型五环三萜类化合物。药理学研究表明,桦木醇具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎症、抗氧化、保肝和降血脂等多种药理作用。本论文研究了桦木醇在大鼠体内的血浆药代动力学和排泄规律,并利用大鼠和人肝微粒体和细胞质溶质研究了桦木醇代谢途径以及分析了相关代谢酶,明确了桦木醇葡萄糖醛酸化和硫酸化代谢同工酶,为桦木醇的进一步应用和开发提供前期基础。针对桦木醇难电离的问题,本论文建立了基于柱前衍生方法的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测桦木醇的方法,并成功应用于大鼠血浆的药代动力学研究。选择了对甲基苯磺酰异氰酸酯(PTSI)为衍生化试剂,在对衍生试剂含量、衍生时间和衍生温度进行优化后,建立了大鼠血浆中桦木醇含量检测方法,检测灵敏度可达1 ng/mL,并从特异性、线性、最低定量限、准确度、精密度、回收率、稳定性及生物基质效应等方面进行了方法验证,结果表明该方法满足生物样品分析方法的要求。大鼠灌胃给药桦木醇500 mg/kg后,8 h达到最大血药浓度59.6 ng/mL,在大鼠体内半衰期(T1/2)和平均滞留时间(MRT)分别为16.9 h和26.3 h。建立了大鼠粪便样品中桦木醇含量检测的超效液相色谱-紫外检测方法(UPLC-UV),并对该方法进行了特异性、准确度、精密度、回收率和稳定性研究,这些结果表明该方法满足生物样品分析要求。大鼠灌胃给药桦木醇500 mg/kg后,桦木醇在大鼠粪便中的累计排泄量达到47.21%,而尿液中未检出桦木醇。以14C标记的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)作为共底物,使用放射化学的方法对桦木醇在大鼠和人肝微粒体作用下葡萄糖醛酸化代谢进行了研究。发现桦木醇与人肝微粒体作用生成一个葡萄糖醛酸化产物,相应酶动力学参数最大反应速度(Vmax)为19.18±1.97 pmol/min/mg 蛋白;米氏常数(Km)为 21.10±5.93 μM;催化效率(Vmax/Km)为0.95±0.20μl/min/mg蛋白。桦木醇与52周成年大鼠肝微粒体作用,葡萄糖醛酸化产物含量相当于人肝微粒体作用时的15%,而与4周幼年大鼠肝微粒体作用后未检测到桦木醇葡萄糖醛酸化产物。对人源葡萄糖醛酸转移酶同工酶研究发现只有hUGTlA3和UGT1A4具有催化桦木醇葡萄糖醛酸化作用,二者对桦木醇的催化效率之间没有明显差异。以35S标记3’-磷酸腺苷-5’-磷酸硫酸酯(PAPS)作为共底物,使用放射化学的方法对桦木醇在大鼠和人肝细胞质溶质中的硫酸化代谢进行了研究,检测出两个硫酸化代谢产物,即桦木醇硫酸化产物Ⅰ和Ⅱ。在大鼠细胞质溶质中,桦木醇硫酸化产物Ⅰ的Vmax是硫酸化产物Ⅱ的9.8倍;而两种代谢物的Km没有明显差异。在人类细胞质溶质中,桦木醇硫酸化产物Ⅰ的Vmax是硫酸化产物Ⅱ的3.7倍;两种代谢产物的Km没有明显差异。对大鼠和人类肝细胞质溶质的比较研究发现,大鼠磺基转移酶对催化桦木醇的硫酸化产物Ⅰ的形成有更高的催化效率;大鼠和人类肝细胞质溶质对催化桦木醇硫酸化产物Ⅱ的形成无种间差异。对人源磺基转移酶同工酶进行研究发现SULT2A1是唯一参与桦木醇硫酸化反应的同工酶,获得的Km等酶动力学参数与人类细胞质溶质研究结果比较,进一步证明SULT2A1是人体肝脏中参与桦木醇硫酸化代谢最主要的同工酶。