在与病原微生物和病毒的对抗期间,真核生物已经具备了抵御病原体侵染的防御能力——先天免疫。先天免疫的发生极大地提高了生物防御病毒感染的能力,在此过程中有多种细胞因子产生致使细胞进行相应的免疫反应。在先天免疫反应中,启动IFN表达是其中一个重要环节,原因在于细胞产生IFN后将其分泌至胞外,分泌出细胞的IFN经特定的信号通路传递信号后使得一系列的抗病毒基因表达,最终消灭病毒的入侵。TBK1在IFN的产生途径起着至关重要的作用,主要原因在于TBK1对IRFs的激活,使得它们能够启动IFN表达。Cdc25a是细胞周期蛋白Cdc25家族成员之一,同样也是一种磷酸酶。以往的研究发现,Cdc25a通过去磷酸化底物蛋白控制细胞周期的进程。近来,众多的研究报道磷酸酶可以通过降低或阻断磷酸化信号的传递来参与免疫反应。在鱼类中,有相关Cdc25a的功能报道,但是Cdc25a在先天免疫反应过程中的功能还未见报道。为研究在草鱼先天免疫信号通路中Cdc25a起着怎样的作用,我们首先就要克隆草鱼Cdc25a基因。草鱼Cdc25a基因c DNA全长2985bp,其CDS有1695bp编码564个氨基酸,5’UTR和3’UTR分别为294bp和996bp。用已上传其他物种Cdc25a蛋白序列和预测的草鱼Cdc25a蛋白序列构建系统进化树,进一步的分析发现草鱼Cdc25a与鲤科鱇浪白鱼Cdc25a的亲缘性最近。随后用poly I:C刺激草鱼,q-PCR检测草鱼Cdc25a的表达,结果显示在受刺激的草鱼组织（眼、脑、肠、鳃、肝、肾、脾、皮）中Cdc25a的表达量都有一个上调的趋势,其中6h时,在肝中的表达量最高。在各组织中,Cdc25a的上调都会随着刺激时间的延伸,最终回复至正常水平。当转染poly I:C刺激CIK细胞时,草鱼Cdc25a的表达量呈现一个先上升后下降的趋势,其中6h时Cdc25a的表达量最高,在刺激满72h后Cdc25a的表达量趋于静息状态。当在CIK细胞中过表达Cdc25a时,IFN1的表达下调,反之在当干扰Cdc25a时,则增强了IFN1的表达。在CO细胞中过表达Cdc25a,wb检测显示Cdc25a也能抑制IFN1的表达,并且这种抑制的效果并不依赖于poly I:C的刺激。我们发现TBK1 Ser172的磷酸化对IFN1的表达及其重要。亚细胞定位的结果显示,在草鱼细胞系中,Cdc25a分布于细胞核和细胞质。我们在CIK细胞中共转Cdc25a和TBK1,发现IFN1表达依然是受到抑制;当我们干扰掉TBK1后过表达Cdc25a时,IFN1的表达量并没有更进一步的降低。同时,免疫荧光共定位和Co-IP实验结果表明Cdc25a和TBK1能够发生相互作用。进一步的研究发现,Cdc25a的表达显著的抑制了TBK1 Ser172的磷酸化。至此,我们的研究发现草鱼Cdc25a响应poly I:C的刺激,且通过抑制TBK1 Ser172的磷酸化来下调IFN1表达。