SVF-gel联合PRP凝胶对皮肤急性缺损创面修复的初步研究

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目的:探讨SVF-gel联合PRP凝胶促进急性创面愈合的机制,为临床应用提供理论基础。方法:35只健康的新西兰兔,18只在无菌条件下,取其血液和腹股沟脂肪组织,分别制备PRP凝胶与SVF-gel;另外17只兔子,于背部分别设计制备4个直径为2cm圆形创面,深达肌膜浅层,A、B、C为实验组,D为对照组。A组创面均匀涂抹PRP凝胶,B组在创缘四周及中央注射SVF-gel(5点),C组联合使用PRP凝胶涂抹与SVF-gel注射,D组为对照组仅注射生理盐水。术后第3、7、10、14、17、21天观察创面肉芽组织生长情况、创面收缩率、周围炎症反应、上皮化程度和创面完全愈合时间。其中8只在术后第24天处死;另9只分别为于术后第5、17、30天处死,每次3只,对创面组织进行苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色、天狼星红染色、石蜡切片免疫组化检测,观察腺样结构、新生毛细血管及胶原纤维的变化。结果:大体观察结果:1.创面愈合情况:术后第3天,肉眼可见四组创面均干燥,A组和C组创面覆盖着PRP凝胶形成的血痂,C组创面残余面积较其余三组大。术后第14天四组创面红肿基本消失。术后第17天C组创面未完全愈合,其余三组均已完全愈合。2.创面愈合率与未愈面积:术后第7天,C组较A组、D组有统计学差异(创面愈合率:C 组为 30.6±0.04%,A 组为 45.1±0.10%,D 组为 44.1±0.06%;未愈面积:C 组为 2.179±0.048 cm2,A组 1.729±0.129 cm2,D 组 1.755±0.078 cm2)。其他时间段四组之间变化无明显统计学意义。3.创面完全愈合时间:C组完全愈合时间较其他三组长(创面完全愈合时间:C组为17.15±1.78 天,A 组为 16.25±1.34 天,B 组 16.61±1.47 天,D 组为 16.74±1.29 天),差异具有统计学意义。组织学观察:1.HE染色:术后第5天,B组表皮增生与肉芽组织的厚度略优于其余三组;术后第17天,C组表皮增生厚度略大于其余三组;术后第30天,A、B组新生血管较C组明显增多。2.天狼星红染色:术后第30天,A组、B组和D组胶原纤维含量无明显差异,但均优于C组。D组Ⅲ型胶原纤维的比例最多,其次是C组,B组和A组基本相似,即D 组>C组>B组、A组。3.Masson染色:术后第30天,组内比较结果显示D组胶原明显多于C组,其结果有统计学意义。其他时间段四组之间变化无明显统计学意义。4.免疫组化:术后第30天,组内比较结果显示A、B组血管密度均大于C组,且具有统计学意义。其他时间段四组之间变化无明显统计学意义。结论:本次实验研究结果显示SVF-gel联合PRP凝胶对于急性全层皮肤缺损创面的治疗效果弱于单独应用PRP凝胶或SVF-gel组以及空白对照组。不排除因PRP浓度以及同种异体移植对实验结果造成影响,其作用机理有待进一步研究。
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