NF-κB及其调控的miRNA在宫颈癌移植瘤及癌旁组织中的活化和表达

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目的:研究宫颈癌移植瘤小鼠的癌与癌旁组织中miR-15b,miR-16的表达状况以及NF-κB信号通路在宫颈癌癌旁组织活化情况,为宫颈癌的早期诊断和治疗提供新思路。方法:采用小鼠宫颈癌U14细胞悬液建立小鼠腹水瘤模型,传3代后将腹水瘤细胞接种于30只昆明小鼠右侧腋窝皮下建立皮下移植瘤模型。待瘤块直径大小为1.5cm×1.5cm时(约15日后),将其颈椎脱臼处死,取癌组织与距离癌组织2cm以上的癌旁组织,以及正常的脂肪组织,应用实时荧光定量PCR方法检测各标本中miR-15b,miR-16的表达状况,利用免疫组化检测NF-κB(p65)蛋白在各组织中细胞质和细胞核的表达及定位情况。结果:1. U14细胞悬液接种于雌性昆明小鼠腹腔,2周后腹水瘤模型成功建立,取其腹水瘤细胞建立皮下移植瘤模型,2周后成瘤率100%,移植瘤切片行HE染色,可见宫颈癌细胞浸润皮下脂肪生长,造模成功。2.实时定量检测miR-15b和miR-16在宫颈癌组织及癌旁组织的表达情况,miR-15b在宫颈癌组织中表达为32.21±3.67,明显高于癌旁组织的25.16±1.86和正常组织的1.00(P<0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P<0.05);miR-16在宫颈癌组织中表达为28.63±2.34,明显高于癌旁组织的22.16±1.76和正常组织的1.00(P<0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P<0.05)。3.免疫组织化学显示在正常脂肪组织中,NF-κB(p65)蛋白主要定位于胞浆,而在癌组织与癌旁组织中,NF-κB(p65)蛋白主要位于胞核。宫颈癌组织中NF-κB(p65)蛋白的表达显著高于癌旁组织和正常组织(P<0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P<0.05)。结论:1. NF-κB通路在宫颈癌组织和癌旁组织中均处于活化状态。2.该信号通路调控的miR-15b和miR-16在癌组织和癌旁组织中亦为高表达状况。3. NF-κB通路及其相关的miR-15b和miR-16可能参与了宫颈癌发生的早期分子事件。
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