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研究背景:肿瘤是人类最常见的一种多基因、多因素疾病,目前全球恶性肿瘤的发病率和死亡率一直居高不下,并且呈现出不断攀升的趋势。肿瘤侵袭转移率高是恶性肿瘤患者预后差、死亡率高的关键因素。侵袭转移的生物学过程涉及大量肿瘤相关基因结构改变与表达异常,是恶性肿瘤的重要生物学特征。因此,通过分析恶性肿瘤本身的基因表达谱和蛋白质表达谱的改变,可了解肿瘤发生发展和扩散的相关基因在组织的表达情况,发现的侵袭转移相关基因,对于改善恶性肿瘤患者的预后具有重要的意义。近年来发现,Egfl7可明显增强细胞运动迁移能力,是一个重要的运动刺激因子,且该蛋白在几种肿瘤细胞系中表达高度上调,提示其在肿瘤侵袭转移方面可能存在潜在的重要作用。而目前尚未见有关Egfl7在常见上皮细胞性实体瘤组织和细胞系以及成人正常组织中表达谱的研究报道,也不清楚Egfl7是否参与恶性肿瘤的侵袭转移。研究目的:检测Egfl7在成人正常组织、10种常见上皮性肿瘤组织及相应肿瘤细胞系中mRNA和蛋白的表达水平,确定其表达谱;分析其在肿瘤细胞的细胞定位;探讨其与肝癌和乳腺癌的临床病理特征和预后的关系,初步了解Egfl7在肝癌和乳腺癌复发转移中的作用,筛选出判断肝癌和乳腺癌预后的潜在标志物,从而为深入研究Egfl7在恶性肿瘤发生发展中的作用奠定基础。研究方法:采用RT-PCR和Western blot检测3例19种成人正常组织、10种常用上皮性肿瘤细胞系和36例肝癌、30例乳腺癌、30例肺癌、30例结直肠癌、30例胃癌、3例脑恶性胶质瘤、3例卵巢癌、6例肾癌、4例前列腺癌及5例食管癌的癌组织标本及相应的癌旁组织标本中的Egfl7mRNA和蛋白表达水平;用细胞免疫荧光分析细胞系中Egfl7蛋白的分布;采用免疫组化的方法检测肝癌132例、乳腺癌102例、肺癌30例、结直肠癌30例、胃癌30例、脑恶性胶质瘤8例、卵巢癌6例、肾癌16例、前列腺癌8例及食管癌10例石蜡切片标本中Egfl7蛋白表达水平及亚细胞定位,比较Egfl7 mRNA与蛋白表达水平在常见上皮性肿瘤癌组织和癌旁组织中的差异,同时探讨肝癌和乳腺癌石蜡切片标本中Egfl7蛋白与其临床病理特征之间的关系。结合临床随访分析Egfl7蛋白表达水平与肝细胞癌和乳腺癌患者预后的关系。结果:RT-PCR和Western blot结果显示:Egfl7 mRNA和蛋白在成人正常组织中仅有少量表达,以肺、视网膜等富血管器官组织则表达水平最高;Egfl7 mRNA和蛋白在10种上皮性肿瘤细胞系中表达水平较高;Egfl7 mRNA和蛋白在10种上皮性肿瘤癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.05)。细胞免疫荧光和免疫组化证实Egfl7蛋白定位在癌细胞胞浆。各上皮性肿瘤癌组织的Egfl7蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织(P＜0.05)。Egfl7表达与HCC和乳腺癌临床病理特征的研究结果显示:Egfl7与HCC结节数目、包膜和有无静脉浸润显著有关(P＜0.05),而与性别、年龄、肝硬化程度、Edmondson-Steiner分级及肿瘤的直径大小等临床病理特征无关;Egfl7与乳腺癌临床TNM分期、淋巴结转移、ER及Her-2显著有关(P＜0.05),而与年龄、肿瘤大小、组织病理类型、细胞分化程度及PR受体等临床病理特征无关。对HCC和乳腺癌的临床随访研究显示,Egfl7蛋白表达强度与肝癌和乳腺癌预后呈负相关,Egfl7高表达组HCC患者术后总体生存时间及无瘤生存时间均明显短于低表达组(中位生存时间410天vs640天,P=0.001;中位生存时间315天vs560天,P=0.007);Egfl7高表达组乳腺癌患者术后总生存时间及无瘤生存时间均明显短于低表达组(中位生存时间1900天vs2710天,P=0.001;中位生存时间1450天vs2110天,P=0.018)。多因素Cox回归分析显示Egfl7蛋白表达强度是肝癌和乳腺癌预后的重要独立影响因素。结论:首次建立了19种正常成人组织、10种上皮性肿瘤及相关肿瘤细胞系的Egfl7表达谱,为进一步深入研究Egfl7在肿瘤的作用奠定了基础。首次分析Egfl7与HCC和乳腺癌的预后关系,证实Egfl7是影响肝癌和乳腺癌预后的独立危险因素,为研究Egfl7作为一种新的肿瘤标志物监测肿瘤复发转移、判断预后提供重要的依据。首次证实Egfl7主要由上皮性癌细胞分泌,亚细胞定位分析位于胞浆,提示Egfl7很可能是HCC的一种新的血清诊断标志物,可用于HCC的诊断、HCC术后复发转移的监测和预后的判断。