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目的:构建大鼠尾静脉注射模型,研究瘦素(leptin)在正常大鼠体内对载脂蛋白M(apoM)表达及分泌的影响。方法:健康成年SD雄性大鼠,采取尾静脉注射方式分别泵入生理盐水和50ng/mlleptin,泵速设为2.5ml/h,持续6hrs。分别检测大鼠血糖、胰岛素、总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。RT-PCR方法检测大鼠肝脏apoM、apoB、LDL-R及apoAI表达的变化,dot-blotting方法血清ApoM的变化。结果:尾静脉置管连续输入50ng/ml leptin6hrs后,SD大鼠肝脏apoM mRNA水平下降55.15%(P=0.0159),apoB和LDL mRNA水平分别下降48.60%(P=0.0079)及40.43%(P=0.0159),apoAI表达增加149%(P=0.0079),而血清apoM水平则无明显统计学差异。尾静脉模型中,50ng/ml leptin对处理组大鼠血清胰岛素水平较对照组下降68.82%(P=0.0317),而血糖增加14.68%(P=0.0079),其他脂蛋白无明显变化。结论:leptin对apoM的表达调节可能首先发生在肝脏,肝脏是leptin调节apoM表达的关键部位。leptin在体内对apoM的表达调节可能与低胰岛素水平和高血糖水平相关。目的:利用大鼠离体肝灌注模型及人正常细胞株LO2细胞,进一步研究leptin在肝脏中对apoM及相关脂质的表达调节作用。方法:健康成年SD雄性大鼠肝脏游离后,将肝脏置于灌注装置中。(1)leptin对离体肝脏apoM表达的影响:持续以5ml/min分别泵入培养液(含牛血清白蛋白30g/L)、含10ng/ml leptin培养液(含牛血清白蛋白30g/L)、含100ng/ml leptin培养液(含牛血清白蛋白30g/L),分别设立对照组,每组8个离体肝灌注模型。持续6hrs后取肝组织标本检测相关指标的mRNA水平。(2)人正常细胞株LO2细胞经不同浓度leptin(10ng/ml、100ng/ml、500ng/ml)分别孵育24hrs后,检测apoM mRNA的表达水平。结果:在离体肝灌注模型中,生理浓度leptin(10ng/ml)对apoM、apoB、LDLR表达无明显影响(P>0.05),超浓度leptin处理组(100ng/ml)能显著上调apoM、apoB、LDLR的表达(P值分别为0.029,0.047,0.008),生理浓度leptin(10ng/ml)和超浓度leptin处理组(100ng/ml)对肝脏apoAI的表达无明显影响(P>0.05)。500ng/ml leptin均能显著下调人正常细胞株LO2细胞apoM mRNA的表达。结论:Leptin对肝实质细胞apoM mRNA表达具有调节作用。离体肝灌注系统缺乏体内的整体调节机制,与正常体内环境相比,leptin与胰岛素之间的反馈调节信号受阻,这可能是leptin在肝灌注系统中对apoM的调节作用不同于体内调节的一个原因。目的:研究大鼠离体肝灌注模型及人正常细胞株LO2细胞中,leptin调控apoM表达的可能机制。方法:离体肝脏灌注组分为4组(8只/组),分别为①培养液(含牛血清白蛋白30g/L)+0ng/ml leptin;②培养液(含牛血清白蛋白30g/L)+0ng/ml leptin+10μMLY294002;③培养液(含牛血清白蛋白30g/L)+100ng/ml leptin;④培养液(含牛血清白蛋白30g/L)+100ng/ml leptin+10μM LY294002。持续以5ml/min泵入上述灌注液,持续6hrs。6hrs后取肝组织标本检测相关指标的mRNA水平。人正常细胞株LO2细胞分别经①RPMI1640培养液+500ng/ml leptin;②RPMI1640培养液+500ng/ml leptin+1μM LY294002;③RPMI1640培养液+500ng/mlleptin+5μM LY294002;④RPMI1640培养液+500ng/ml leptin+10μM LY294002孵育24hrs后,检测apoM mRNA表达水平的变化。结果:LO2细胞经500ng/ml leptin及不同浓度的PI3K阻断剂LY294002共孵育24hrs后,对apoM的表达水平无明显改变(P>0.05)。含10μM PI3K阻断剂LY294002的RPMI1640培养液组灌注6hrs后,与对照组相比apoM表达水平明显上升;超生理浓度的leptin(100ng/ml)与10μM LY294002(0μM LY294002)共灌注6hrs后,与单独使用生理浓度的leptin(100ng/ml)灌注组相比,apoM表达水平无统计学差异。通过双因素相关性分析,leptin与LY294002两种处理因素不存在交互作用。结论:Leptin在体外对apoM的表达调控可能不是通过PI3K途径实现的。