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目的:依据“药味由中药中的化学成分决定,药味与药物的具体功效相关”的中药性味理论,探讨薏苡仁不同拆分组分对脾虚水湿不化证大鼠免疫功能及水盐转运的影响;从mRNA表达谱水平解析薏苡仁功效作用,深入研究薏苡仁性味物质基础及分子机制,进而为中药药性理论研究提供证据和思路。方法:SPF级Wistar大鼠,按照项目组前期建立的方法复制脾虚水湿不化证大鼠模型;以薏苡仁不同组分进行干预,比较各组分对外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4)、免疫球蛋白(IgA、IgG)和补体C3的影响,探讨其对免疫功能的影响;比较各组水负荷指数、尿量饮水量、ALD、ADH变化,探讨各组分对水盐转运功能的影响。采用mRNA表达谱分析研究各组分对模型大鼠空肠基因表达影响,并随机选择4个差异基因(Fab1、Tpt1、Per2和Aqp3)进行qRT-PCR验证表达谱芯片的可靠性;以FC>2为标准筛选差异基因,对差异基因进行GO富集,对注释的分类进行深度挖掘;并选择空肠基底膜和细胞间隙相关的差异基因及免疫功能和转运功能差异基因进行机制探讨。由于AQP3为肠道水液代谢重要指标,与水盐转运关系密切,研究采用免疫组化和Western blot进行蛋白表达测定,进一步验证其表达并探讨其作用及机制。结果:模型组体重、自主活动降低,一般状况评分升高,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01);薏苡仁各组分治疗后,体重和自主活动有增加的趋势,但与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);薏苡仁各组分治疗后,一般状况评分下降,且与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫功能分析显示,与空白对照组比较,模型组CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞表达降低,CD3+CD8+T淋巴细胞表达升高,CD3+CD4+/CD3+CD8+降低(P<0.05),薏苡仁各拆分组分治疗后上述指标均明显改善;与空白对照组比较,模型组IFN-γ、IL-2、IgA、IgG和C3水平降低,IL-4水平升高(P<0.05),薏苡仁各拆分组分治疗后上述指标均明显改善,油组疗效最为显著,与模型组差异具有统计学意义(P<0.05)。水盐转运功能分析显示,与对照组相比,模型组水负荷指数明显增高(P<0.01),排除饮水量影响后,尿量下降(P<0.01);水煎液、蛋白和油组水负荷指数下降明显,与模型组差异具有统计学意义(P<0.05),蛋白组尿量增加(P<0.01);模型组ALD、ADH水平升高,与正常对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),各组分治疗组ALD、ADH指标均降低,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。表达谱芯片分析显示,模型组与空白对照组有2622条差异基因,各给药组与模型组差异基因数均在1000条以上;其中,蛋白组差异基因数最少,为1188条,油组最多,为2410条。与模型组相比,蛋白、淀粉组共同差异基因数较少,多糖、油组共同差异基因数较多。将各组差异基因进行GO功能注释,对细胞基底膜、细胞间隙和免疫功能、转运功能注释到的差异基因进行PCA分析后发现,主要差异基因为Slc家族、AQP家族、趋化因子、Car、Msn、ApoE等;进一步分析显示,薏苡仁各组分治疗机制不同,油组分对免疫功能的调节作为更为显著,主要作用基因为趋化因子群;而蛋白组分对转运功能调节作用更为显著,主要作用基因为Scl和AQP家族;多糖和淀粉组分两方面作用较为均衡。结论:薏苡仁各拆分组分均可改善脾虚水湿不化证大鼠免疫和水盐转运功能,但作用机制不同。油组分对免疫功能的调节作为更为显著,其主要作用基因为趋化因子群;而蛋白组分对转运功能调节作用更为显著,其主要作用基因为Scl和AQP家族;多糖组分和淀粉组分两方面作用较为均衡。各组分作用不同,说明薏苡仁不同功效的物质基础并不完全一致,研究时应有所侧重。