前列腺跨膜蛋(TMEPAI)在正常细胞中低表达,而多数肿瘤细胞中高表达,但TAEPAI基因转录调控机制尚不清楚。研究报道,TMEPAI是TGF-β通路的靶基因,TGF-β可以诱导TMEPAI表达,然而过表达TMEPAI蛋白又负反馈调控TGF-β信号通路。TMEPAI在细胞中定位于溶酶体和晚期内吞体,TMEPAI通过TβRI发生相互作用,促进其通过溶酶体途径降解,从而抑制TGF-β信号,促进肿瘤的发生。本论文为了研究TMEPAI基因的转录调控机制,克隆并分析了 TMEPAI基因启动子功能。荧光素酶和截短突变体分析表明,-298～+24 bp区域是TMEPAI基因启动子基础活性区域;定点突变分析表明,两个转录因子Sp1结合位点和一个转录因子CREB结合位点对维持TMEPAI基因启动子基础活性至关重要;此外,利用补丁甲基化技术构建荧光素酶报告质粒检测DNA甲基化对TMEPAI基因启动子活性,发现TMEPAI基因启动子甲基化抑制启动子活性。染色质免疫沉淀(ChIP)证明转录因子Sp1和CREB直接结合到TMEPAI基因启动子上。通过转录因子Sp1和CREB的过表达和RNA干扰实验,发现过表达Sp1和CREB可以促进TMEPAI基因启动子的转录活性和TMEPAI蛋白的表达。进一步研究表明,Sp1和CREB可以诱导TMEPAI蛋白表达,抑制TGF-β信号通路,从而促进肿瘤细胞发生。总之,本论文的研究有助于更好的理解TMEPAI基因的表达调控及其在肿瘤发生中的作用机制,这为以TMEPAI作为一个靶点治疗肿瘤提供了进一步的理论依据。