【摘 要】
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目的:用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative polymerase chain reaction,QPCR）检测食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织及癌旁组织中碳酸酐酶Ⅸ（Carbonic Anhydrase Ⅸ,CAIX）含量的差异性;探讨靶向碳酸酐酶Ⅸ新型锰造影剂（manganese contrast medium ta
【基金项目】
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国家自然科学基金:靶向肿瘤细胞与新生血管MRI/NIR双模态分子探针的制备及其用于食管鳞癌早期检测实验研究（编号:81571654）；
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目的:用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative polymerase chain reaction,QPCR）检测食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织及癌旁组织中碳酸酐酶Ⅸ（Carbonic Anhydrase Ⅸ,CAIX）含量的差异性;探讨靶向碳酸酐酶Ⅸ新型锰造影剂（manganese contrast medium targeting of carbonic anhydraseⅨ,CAIX-Mn）对裸鼠ESCC移植瘤成像的靶向性。方法:（1）收集我院3例ESCC患者的癌组织及其癌旁组织,并用QPCR技术检测各自CAIX含量,并对比其差异性。（2）将新型造影剂CAIX-Mn配制成不同浓度并使用电感耦合等离子体质谱仪（Iinductively Coupled Plasma Mass Spectrometer,ICP-MS）标定,在32℃条件下,用0.4T磁共振扫描仪测定弛豫时间并弛豫效率。使用CCK-8（Cell Counting Kit-8）试剂盒检测新型CAIX-Mn造影剂的细胞毒性（RAW246.7细胞系）。（3）取对数生长期Eca-109细胞悬液（2×106/mL）,按每只200-300μL注入裸鼠（BALB/c-nu雄性裸鼠,n=12）左后肢大腿腹侧皮下。在20～26℃室温、40%～70%湿度条件下,采用无特定病原（Specific-pathogen Free,SPF）层流架进行饲养。待移植瘤生长到直径约5-10mm,随机等分为两组,每组各6只,实验组采用新型CAIX-Mn造影剂行增强T1加权成像（T1 weighted imaging,T1WI）,对照组采用钆喷酸葡胺行T1WI增强扫描。在对实验组和对照组动物移植瘤成像时,均通过尾静脉以100umol/Kg体重的剂量分别注射新型CAIX-Mn造影剂和钆喷酸葡胺造影剂,于造影剂注射前后 2min、4min、6min、8min、10min、30min、40min、50min、60min,用3.0T磁共振扫描,测量各个时间点T1WI信号强度（Signal Intensity,SI）,并计算其对比噪声比（Contrast-to-Noise Ratio,CNR）值。使用配对t检验分析两种造影剂注射前与注射后各个时间点各自的信号差异;使用独立样本t检验分析两种造影剂之间各个时间点肿瘤CNR值的差异性。结果:（1）ESCC组织CAIX的表达量明显高于癌旁组织（P＜0.05）。（2）新型CAIX-Mn造影剂纵向弛豫效率r1=6.750 mM-1s-1;细胞毒性实验显示当造影剂浓度达0.1mol/L时,细胞48h存活率为79.4%。（3）磁共振扫描结果显示:实验组在注入新型CAIX-Mn造影剂后肿瘤信号强度逐渐增强,到30min到达最高点,其CNR值为26.923±8.568;对照组在注入钆喷酸葡胺后,肿瘤信号强度逐渐增强,到4min到达最高点,其CNR值为16.997 ±9.161。在注射造影剂后 10min、30min、40min、50min、60min 实验组 CNR 值均高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:（1）ESCC组织中CAIX mRNA表达量明显高于其癌旁组织。（2）新型CAIX-Mn造影剂纵向弛豫效率较高,且细胞毒性较低,具有较好的生物相容性。（3）新型CAIX-Mn造影剂在对ESCC移植瘤成像时在注射造影剂10-60min期间CNR值均高于钆喷酸葡胺,表明其对ESCC详细具有一定的靶向性及特异性。
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