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目的:多发性硬化(MS)是一种以炎性脱髓鞘和轴索损伤为特征的免疫介导的中枢神经系统疾病。多发性硬化的病因和机制尚不明确,但炎症是这个疾病早期最重要的环节。各种细胞因子以自分泌或旁分泌方式,组成了一个复杂的动态网络结构,参与了免疫反应的所有过程及阶段,在调节免疫反应和组织修复中起着关键性作用,决定着多发性硬化的病情严重程度及发展趋势。我们课题组前期对Nrf2通路激活剂莱菔硫烷的研究中发现其增强小鼠抗氧化应激能力和调节免疫机制,在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中起到神经保护作用。然而莱菔硫烷尚未应用于临床,通过文献查阅,我们发现了可应用于人体的Nrf2通路激活剂——马索罗酚。马索罗酚在MS的免疫调节机制中的作用尚未明确,需要进一步的研究。本实验以马索罗酚作为干预药物,观察EAE小鼠及马索罗酚治疗小鼠发病严重程度及病程的影响。研究马索罗酚对EAE小鼠IL-4、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TGF-β表达的调节作用。进而探索相关细胞因子在EAE病程中的作用,并研究马索罗酚在EAE免疫学机制中是否发挥神经保护作用。方法:将54只8至10周雌性C57BL/6小鼠,体重18g至20g,随机分成control组、EAE组和NDGA组,各组分别为18只。每组分为2个亚组,10天组及20天组,各亚组为9只。建立EAE动物模型。NDGA组小鼠自发病(weaver评分≥1分)当天(记为第0天),每只每日腹腔注射NDGA溶液10mg/kg。EAE组及control组小鼠自第0天,每只每日腹腔注射5%DMSO 10ml/kg。每日一次,直至处死。每天2次对其进行称重和神经功能的评分。利用实时定量PCR方法检测脊髓及脾中IL-4、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TGF-β表达水平,用ELISA方法检测脑组织中IL-4、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TGF-β表达水平。结果:1在发病第10天及第20天,NDGA组平均神经功能评分均较EAE组显著降低(P<0.05)。2各组小鼠脊髓及脾组织中IL-4、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TGF-β的m RNA水平:在发病10天时,与Control组对比,EAE组IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γm RNA水平均增高,NDGA组IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γm RNA水平较EAE组低,并有统计差异(P<0.05)。EAE组TGF-β、IL-4 m RNA水平降低,NDGA组TGF-β、IL-4 m RNA水平较EAE组高,并有统计差异(P<0.05)。在发病20天时,与Control组对比,EAE组IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γm RNA水平均增高,NDGA组IL-12、IL-17、IFN-γm RNA表达较EAE组低,并有统计差异(P<0.05)。EAE组TGF-β、IL-4 m RNA水平降低,NDGA组TGF-βm RNA水平较EAE组高,并有统计差异(P<0.05)。3各组小鼠脑组织中IL-4、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TGF-β含量变化情况:在发病10天时,与Control组对比,EAE组IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ的表达均增高,NDGA组IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ的表达较EAE组低,并有统计差异(P<0.05)。EAE组TGF-β、IL-4的表达降低,NDGA组TGF-β、IL-4的表达较EAE组高,并有统计差异(P<0.05)。在发病20天时,与Control组对比,EAE组IL-17、IFN-γ的表达均增高,NDGA组IL-17、IFN-γ表达较EAE组低,并有统计差异(P<0.05)。NDGA组TGF-β的表达较EAE组高,并有统计差异(P<0.05)。结论:1 EAE的发病和缓解与炎症因子的动态变化相关。2 NDGA可以减轻EAE小鼠神经功能损害严重程度,促进神经功能恢复,对EAE小鼠具有保护作用。3 NDGA可以降低EAE脑、脊髓及脾组织中促炎症细胞因子IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ水平,增加抗炎症细胞因子IL-4和TGF-β水平,具有免疫抗炎作用。4调节免疫炎症平衡可能是NDGA对EAE发挥保护作用的机制之一。