【背景与目的】普遍认为，白血病治复发的根本原因主要是治疗过程中休眠逃逸且能自我增殖克隆的白血病干细胞的存在。而在白血病干细胞自我更新、增殖克隆及生存中，干细胞自我更新通路扮演着重要的角色。干细胞自我更新通路的异常激活可导致白血病细胞分化成熟受阻，造成恶性克隆的异常蓄积，进而导致白血病复发。　　wnt/beta-catenin通路及hedgehog/gli1通路是两条经典的干细胞自我更新通路。研究发现，这两条通路的异常激活与多种血液系统恶性克隆的持续存在相关，并且影响临床预后，但具体的致病机制仍不清楚。现有关于血液系统恶性疾病与干细胞自我更新通路的研究多侧重于单一通路的研究，主要集中在髓性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等研究中，目前缺乏干细胞自我更新通路与儿童急性淋巴细胞白血病的相关性及通路间是否可能存在交联致病作用的研究。　　本研究中，我们将这两条干细胞自我更新通路的核心因子 beta-catenin(来自wnt/beta-catenin信号通路)及 gli1(来自 hedgehog/gli信号通路)作为检测靶目标，通过检测儿童急性淋巴细胞白血病患儿治疗处于不同状态时（复发或缓解）骨髓单个核细胞中beta-catenin及GLI1的表达差异，探索在儿童急性淋巴细胞白血病中的主导干细胞自我更新通路，初步探索白血病复发的分子机制，为下一步研究奠定基础。　　【材料与方法】　　对象：选取在汕头大学医学院第二附属医院初次就诊且在我院进行规则治疗并定期随访>4年（2009-2014）的急性淋巴细胞白血病患儿12例，并根据患儿治疗过程中有无出现复发事件分为两组，其中复发组5例（T-ALL1例，B-ALL4例），出现复发事件后随访终止，视为追踪结局状态。未复发组7例（其中T-ALL3例，B-ALL4例），随访大于4年后随访终止，持续缓解状态视为结局状态。治疗期间在取得患儿家属及监护人知情同意和伦理审核通过后予骨髓穿刺术并留取患儿各时间点的骨髓标本（骨髓穿刺术时间均按中国白血病诊疗临床路径规定）。在本研究中，每个组各取两个时间点的骨髓标本进行预实验检测:复发组:第一次完全缓解(1st CR)、追踪结局状态（复发时）标本；未复发组：第一次完全缓解（1st CR）、追踪结局状态（持续完全缓解）标本。由于正常儿童骨髓标本获取的困难及伦理争议，本实验未能找到正常儿童骨髓作为阴性对照,仅依据不同时间的变化形成自身对照。　　方法：（1）采用WESTERN BLOT法方检测两组患儿第一次CR状态及结局状态骨髓单个核细胞beta-catenin及gli1的表达情况，T-TEST方法分析各组各时间点的表达差异。　　（2）流式细胞术检测同一样本的细胞表面分化抗原 CD34及微小残留白血病（MRD），采用Spearman相关分析分析beta-catenin及gli1的表达与微小残留白血病（MRD）及CD34的相关性。　　（3）我们将beta-catenin、GLI1、CD34、MRD检测结果与ALL患儿临床资料结合起来，采用spearman系数分析复发事件及无复发缓解时间的相关因子。　　【结果】　　(1)本研究中，12例急性淋巴细胞白血病患儿骨髓单个核细胞中均可检测到Beta-catenin和gli1的共表达。复发时骨髓单个核细胞beta-catenin及gli1的表达较完全缓解状态明显升高,而第一次CR状态与持续CR状态的beta-catenin及gli1的表达无明显差异。并且，随着两组结局事件的不同（复发或持续 CR），beta-catenin及gli1在两个检测状态的表达变化也存在明显差异。　　(2)本研究中，Beta-catenin及gli1的表达与急性淋巴细胞白血病患儿骨髓微小残留白血病（MRD）及复发事件存在高度正相关。在两个检测状态间beta-catenin、gli1的变化趋势也与MRD的变化趋势呈现高度相关性，说明，beta-catenin及gli1的表达与白血病恶性克隆及复发高度相关。　　(3)本研究中，Beta-catenin和gli1在12例儿童急性淋巴细胞白血病患儿骨髓单个核细胞的表达始终呈现高度正相关关联。这表明，beta-catenin和gli1协同参与白血病恶性克隆的增生，wnt/beta-catenin信号通路及hedgehog/gli1信号通路间可能存在交联。　　(4)本研究中，CD34的表达与复发事件呈现负相关关联，而与无复发缓解时间呈现正相关关联。复发时骨髓单个核细胞beta-catenin、gli1及MRD的检测结果与CD34呈现明显负相关关联,这说明，MRD可能不只存在于 CD34高表达的细胞群，beta-catenin及gli1异常激活的白血病细胞可能不依赖于CD34高表达的白血病干细胞。　　【结论】　　我们的研究首次在临床儿童急性淋巴白血病骨髓细胞样本中检测到 beta-catenin及gli1的共表达，并且发现beta-catenin及gli1在复发时的表达较持续缓解（CR）时明显升高，beta-catenin及gli1的高表达与白血病的复发及微小残留白血病MRD具有高度正相关性。因此，我们推断，beta-catenin及gli1可能协同参与了白血病复发的机制，并且，可能成为ALL复发的预测因子，监测ALL患儿治疗过程中骨髓单个核细胞beta-catenin及gli1的表达变化趋势，可能成为预测复发及逆转复发的靶向。