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目的:广山楂为蔷薇科植物台湾林檎Malus doumeri（Bois.）Chev或光萼林檎Malus leiocalyx S Z Huang的干燥成熟果实,主要含有黄酮类化合物,其黄酮含量是山楂的两倍多,具有明显的降血脂、抗氧化、保肝作用。而对于广山楂叶总黄酮对于抗动脉粥样硬化尚未文献报道,本课题通过以广山楂叶为研究对象,采用响应面优化法研究广山楂叶总黄酮物质的提取工艺,并对其抗动脉粥样硬化开展研究,以ApoE-/-基因敲除小鼠建立小鼠动脉粥样硬化模型,研究广山楂叶总黄酮抗动脉粥样硬化的药效作用及有效部分,并进一步阐明其作用机制,为开发针对动脉粥样硬化的中药新药及健康产品,提供可靠的实验依据,从而提高AS临床防治效果,为合理利用这一资源开发健康产品提供参考依据。方法:1.广山楂叶不同提取物对急性高血脂小鼠的药效筛选研究KM小鼠60只,在实验室环境下用基础饲料适应性喂养一周,随机分为A、B、C、D、E、F共6组,每组10只小鼠。采用随机数列分组法按体重将6组小鼠均匀分组,分为正常对照组、急性模型组、阳性药组、广山楂叶水提组、广山楂叶50%醇提组、广山楂叶95%醇提组。除空白组、模型组给予生理盐水灌胃;阳性组,给予辛伐他汀混悬液5 mg/kg灌胃;广山楂叶水提组,给予样品溶液2.275 g/kg灌胃;广山楂叶50%醇提组,给予样品溶液2.275 g/kg灌胃;广山楂叶95%醇提组,给予样品溶液2.275 g/kg灌胃;实验干预时间为一周,每天灌胃一次,灌胃剂量为0.2 ml/10 g,实验期间小鼠自由饮水取食。实验第6天时,禁食18 h后,眼球取血,检测（1）血脂四项。（2）动脉粥样硬化指数（3）LDLC/HDLC的比值。并筛选除降血脂有效部位。2.响应面优化法广山楂叶中黄酮类物质的提取工艺利用Design-expert 8.0.6软件中Box-Behnken法提取工艺参数设计试验,考察提取广山楂叶总黄酮乙醇体积分数、提取温度、提取时间、料液比为自变量的单因素实验,之后,以提取剂乙醇体积分数、提取温度、提取时间、料液比为自变量,以广山楂叶总黄酮提取量为响应值。之后对广山楂叶总黄酮进行分离纯化,筛选最佳有效部位。3.广山楂叶总黄酮对ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变形成的影响C57BL/6J小鼠8只为A组,作为正常对照组,给予基础饲料和纯水灌胃,ApoE-/-小鼠48只随机分为B、C、D、E、F六组,给予高脂饲料。B组为模型组,给予纯水灌胃;C组为阴性组,给予纯水灌胃;D组为阳性组,给予辛伐他丁5 mg/kg灌胃;E组为广山楂叶总黄酮低剂量,给予样品溶液5 g/kg灌胃;F组为广山楂叶总黄酮高剂量组,给予样品溶液20 g/kg灌胃;实验干预时间为16周,造模8周后开始给药,每天灌胃两次,灌胃剂量为0.2 ml/10 g,实验期间小鼠自由饮水取食。禁食18 h,眼球取血,检测:（1）氧化酶法测定血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量。（2）苏木精-伊红（HE）染色观察和测量小鼠动脉粥样硬化斑块的组织学特点及病变面积。（3）计算动脉粥样硬化指数以及LDLC/HDLC比值。（4）分析广山楂叶总黄酮对ApoE-/-模型小鼠血脂与肠道菌群的调节作用。结果:1、广山楂果叶提取物对急性高血脂小鼠形成的影响（1）血脂四项:与正常组比较,模型组TC、TG、LDL-C值均升高,HDL-C值降低;与模型组比较,阳性组、广山楂叶50%醇提物组的TC、TG、LDL-C值均降低（P＜0.01或0.05）,HDL-C值有一定的升高趋势。（2）给药组AI指数与LDLC/HDLC比值明显下降（P＜0.01或0.05）。2.广山楂叶总黄酮响应面最佳提取工艺广山楂叶总黄酮响应面最佳提取工艺60%乙醇,提取温度为72℃,提取时间1.8 h,料液比为1:15。分离纯化后,筛选出有效部位为60%乙醇洗脱液。3、广山楂叶总黄酮对ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变形成的影响（1）血脂四项:与正常组比较,模型组TC、TG、LDL-C值均升高,HDL-C值降低;与模型组比较,阳性组、广山楂叶总黄酮高、低剂量组TC、TG、LDL-C值均降低（P＜0.01或0.05）,HDL-C值均升高。（2）HE染色:模型组小鼠主动脉具有明显的粥样硬化病变。阳性组、广山楂叶总黄酮高、低剂量组小鼠主动脉斑块的横截面积减小,减缓AS的发展。（3）广山楂叶总黄酮各剂量组以及阳性药组,与模型组相比,各给药组肠道菌群中的拟杆菌门、厚壁菌门及变形菌门相对丰度要高;广山楂叶总黄酮各剂量组和辛伐他汀组小鼠肠道菌群多样性多于模型对照组的趋势及显著性差异（P＜0.01或0.05）,其中广山楂叶总黄酮高剂量组小鼠肠道菌群多样性多于辛伐他汀组有增加的趋势（P＜0.01或0.05）。结论:1、广山楂叶总黄酮可以降低高脂饲养ApoE-/-基因敲除小鼠血浆TC、TG、LDL-C值,升高HDL-C水平,显著减少主动脉粥样硬化病变面积。2、广山楂叶总黄酮可以调节高脂饲养ApoE-/-基因敲除小鼠的肠道环境。