落地原油污染土壤修复微生物菌剂开发研究

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随着环境污染问题的日益加重,落地原油污染土壤的问题也越来越引起人们的重视,本文以分离筛选、构建高效菌株为基础,制备成高效复合微生物修复菌剂,通过实验摸索最优的微生物降解条件、最佳菌剂制备工艺和关键影响因素,使得高效复合微生物菌剂油污土壤的降解效果最好。结论如下:(1)分离筛选出4株高效降解石油菌株分别命名为DB-1、DB-2、DB-3、DB-4,经菌落形态和生理生化实验鉴定,可得DB-1为假单胞菌属(Pseudomonassp.),DB-2属于枯草芽孢杆菌属(Bacillus sp.),DB-3属于红球菌属(Rhodococcus sp.),W-4属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。(2)在不同条件对降解率的影响实验中,培养时间为9d降解效果最好,最大降解效果为45.3%;油浓度为500 mg/L时效果最好降解效果达到65.4%;在p H值为7时最大降解率为73.8%;在菌液接种量为6%时达到最佳降油效果为63.2%;当Na CI浓度为2%时最大降解率为68.3%;在以蛋白胨为N源时降解率最大为72.3%;在以添加酵母粉为辅助N源时降解效果最好为69.1%。(3)由四种菌株不同接种比例的四因素三水平正交试验可得降解效果最佳的复合菌剂组合为A3B3C1D2,降解率可高达82.7%。复合菌剂的最佳制备工艺进行正交试验,最佳工艺条件为制备温度为40℃、菌剂制备p H为8,载体(麦麸:秸秆)的质量比例百分数为3:1,原油降解效果达到最佳为72.1%。(4)在不同添加条件对复合修复菌剂实验中,复合菌剂对含油量为2%的油污土壤降解率最高;综合脱氢酶活性实验投加量为10%的复合菌剂的降油效果最好为74.7%。结合脱氢酶实验修复进行到第40d时最大降油率为73.4%。
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