【摘 要】
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目的此课题旨在基于探究胃黏膜和粪便微生态在胃癌中的变化,筛选并验证细菌可作为生物标记物,日后可能临床应用于胃癌诊断、早期胃癌筛查的一种非侵入性、精确、简便、灵敏、人群接受度高的检测方法。方法我们通过16S r RNA基因测序在队列1中的13名胃癌患者和7名慢性萎缩性胃炎患者的胃黏膜及粪便的配对标本中筛选出胃黏膜及粪便中发生协同变化的差异菌种,进一步通过实时定量PCR的方法分别在队列2中胃癌组和对照
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目的此课题旨在基于探究胃黏膜和粪便微生态在胃癌中的变化,筛选并验证细菌可作为生物标记物,日后可能临床应用于胃癌诊断、早期胃癌筛查的一种非侵入性、精确、简便、灵敏、人群接受度高的检测方法。方法我们通过16S r RNA基因测序在队列1中的13名胃癌患者和7名慢性萎缩性胃炎患者的胃黏膜及粪便的配对标本中筛选出胃黏膜及粪便中发生协同变化的差异菌种,进一步通过实时定量PCR的方法分别在队列2中胃癌组和对照（胃炎）组检测菌种的相对丰度,验证测序结果,其中包含141份癌组织及癌旁正常组织标本、127份对照组内镜下胃黏膜活检标本、217份胃癌组术前粪便及124份对照组内镜检查前粪便标本。其中35名胃癌患者、64名胃炎患者同时提供其胃黏膜与粪便配对标本。通过与肿瘤标记物的联合检测,我们评估该差异细菌在胃癌的早期筛查、预警、诊断中的效力。结果通过16S r RNA基因测序筛选出Streptococcus anginosus和Streptococcus constellatus在胃癌组和对照组中胃黏膜、粪便中发生同步变化。q PCR进一步证实了上述测序结果。在胃黏膜及粪便中,胃癌组S.anginosus和S.constellatus的相对丰度较胃炎组显著升高（黏膜S.anginosus:P=0.013,S.constellatus:P=0.01;粪便S.anginosus:P<0.0001,S.constellatus:P<0.0001）,且S.anginosus,S.constellatus的相对丰度分别在癌组织与癌旁正常组织间呈中等强度的正相关性。胃癌患者癌组织中S.anginosus,和S.constellatus的相对丰度分别与H.pylori呈正相关性。肿瘤浸润深度为影响两菌丰度差异的主要因素,当肿瘤未浸润至浆膜下层时,S.anginosus和S.constellatus在肿瘤组织中的相对丰度显著高于胃炎组,并且早期胃癌患者粪便中两菌相对丰度显著高于胃炎及进展期胃癌患者。当粪便中两菌丰度与肿瘤标记物（癌胚抗原,糖类抗原72-4,糖类抗原19-9）联合后,对胃癌诊断的曲线下面积（AUC）达0.88,较单用上述3项肿瘤标志物准确性高（P<0.0001）。检测粪便中两菌丰度对早期胃癌诊断的AUC达0.899,灵敏度80%。结论胃黏膜和粪便中的S.anginosus和S.constellatus相对丰度在胃癌患者中发生了协同性升高。我们发现一种基于粪便S.anginosus和S.constellatus相对丰度的生物标记物联合肿瘤标志物检测,将来可能用于有效筛查早期胃癌、协助减少普通胃镜的漏诊率、准确诊断胃癌的一种无创、精确、灵敏、简便、人群接受度高的胃癌生物标记物。
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