C-terminal binding proteins(CtBPs)是一类经典的转录共阻遏因子，在生物体的生长发育和疾病的形成过程中发挥重要的功能。CtBPs涉及细胞核内的转录调控，中枢神经系统的发育以及肿瘤的发生，可能会成为癌症研究的重要靶向蛋白之一。Polycomb(Pc)蛋白是Polycomb group(PcG)复合体中的一员。PcG蛋白作为一类最为重要的转录阻遏因子之一，也表现出在多细胞生物的发育中的核心地位。例如，PeG阻遏Hox基因的表达对体节的形成至关重要；最近的研究还表明，PcG在胚胎干细胞的分化过程中起关键作用。哺乳动物的研究表明CtBP可能参与PcG介导的靶基因的转录抑制作用，但具体机制尚不十分清楚。而果蝇体内CtBP是否影响Pc的转录抑制，目前尚未见报道。　　本文以果蝇为模式生物，用遗传学的方法进行研究，结果发现CtBP能拮抗Pc介导的同源异型基因的转录抑制作用。PcG成员的杂合突变会产生同源异型转化的表型，即在雄性果蝇的第二及第三对足上出现多余的性梳，而CtBP突变体本身不具有PcG家族成员突变后导致的同源异型转化的表型。当本实验室在CtBP杂合突变的背景下引入PcG家族成员Pc的杂合突变，却发现CtBP杂合突变能减弱了Pc杂合突变所导致的表型，这从遗传学的角度上说明，CtBP是Pc调节同源异型基因转录抑制的拮抗因子。这个研究结果出乎研究者的预料，因为和脊椎动物的结果是相反的。　　为了探索CtBP拮抗Pc的转录抑制作用的具体分子机制，本实验室紧接着研究了两者的相互作用。本实验室通过免疫共沉淀以及GST Pull-down的实验证明了CtBP与Pc存在着相互作用，即表明CtBP对Pc转录抑制的拮抗作用可能是通过它们之间的相互作用所介导的。　　随后，本实验室在细胞水平进行了RNAi实验，初步探讨了CtBP对Pc介导的靶基因的转录阻遏的拮抗作用。本实验室前期研究表明，Pc对其靶基因pannier(pnr)和caudal(cad)具有转录阻遏作用，对Pc进行RNAi可以使pnr和cad的转录显著地去阻遏。因此，本实验室对CtBP和Pc同时进行了RNAi干扰，实验结果表明，只干扰CtBP时，pnr和cad的转录与Ctrl相同，都受到阻遏；只干扰Pc时，pnr和cad的转录会显著地去阻遏；而当研究者同时干扰CtBP和Pc时，pnr和cad的转录又受到了明显的阻遏。以上结果表明：CtBP能拮抗Pc介导的靶基因pnr和Cad的转录抑制作用。另一方面，当CtBP和Pc分别进行RNAi干扰后，Pc的靶基因rpr、wg、pnt、h和gt的转录是受阻遏的，而当CtBP和Pc同时进行RNAi干扰之后，rpr、wg、pnt、h和gt的转录是去阻遏的。说明CtBP对Pc的靶基因的调节存在基因特异性。　　综上所述，本研究工作发现了CtBP能拮抗Pc介导的同源异型基因的转录抑制作用。为了进一步探讨CtBP拮抗Pc转录抑制的具体机制，本实验室分别在果蝇细胞水平和体外进行了一定的研究。体外蛋白质相互作用实验则证明了CtBP与Pc之间确实存在相互作用；果蝇细胞水平的RNAi干扰实验初步验证了CtBP对Pc介导的靶基因转录抑制的拮抗作用存在基因特异性。同时，为了后续实验的需要，研究者通过蛋白免疫印迹技术获得了CtBP过表达水平一致的转基因果蝇。这些转基因果蝇是之前本实验通过显微注射获得的。本研究工作为CtBP的功能提供了新的见解，这些结果更加真实地反映了CtBP参与基因表达调控功能的复杂性。