【摘 要】
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该课题首次应用杂交瘤技术建立了抗m受体的杂交瘤细胞株;用秋水仙素阻断法及免疫扩散试剂盒对所建立的杂交瘤细胞株及其分泌的单抗进行鉴定;用PEG-6000二步沉淀法与Sephadex
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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该课题首次应用杂交瘤技术建立了抗m<,3>受体的杂交瘤细胞株;用秋水仙素阻断法及免疫扩散试剂盒对所建立的杂交瘤细胞株及其分泌的单抗进行鉴定;用PEG-6000二步沉淀法与Sephadex G-50相结合化m<,3>受体单抗,并对其特异星进行鉴定;最后应用所制备的单抗测定m<,3>受体在眼前段组织、视网膜的分布,从而探讨胆碱能药物分子药理学的作用机制.结论:1.用m<,3>受体亚型特异性胞外多肽为抗原,首次成功的制备了抗m<,3>受体亚型的单克隆抗体,为其它m受体亚型单抗的制备开辟了先例;2.McAbm3b与m<,1>、m<,2>、m<,4>受体、α受体、β受体及心肌细胞膜上的蛋白无交叉反应,只针对m<,3>受体亚型,具有较高的特异性,为研究m<,3>受体特征和分布提供一个良好的工具;3.从Balb/c小鼠腹水中分离纯化的McAbm3b,具有高纯度(96.3%),高滴度(1:1000),蛋白含量为0.2mg/ml,符合抗体应用的要求;4.用McAbm3b作人眼的免疫组织化学,发现虹膜、睫状肌、睫状体非色素上皮、视网膜富含m<,3>受体,而睫状体色素上皮未见m<,3>受体.且睫状肌的纵行纤维上m<,3>受体的量多于环行纤维,提示m<,3>受体特异激动药可能成为强降眼压而只有微弱的调节痉挛作用的抗青光眼药物.
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