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第一部分p38MAPK特异性激动剂和抑制剂对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的影响目的:研究p38特异性激动剂和抑制剂对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法:建立沙土鼠5 min前脑缺血再灌注模型.动物随机分为假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)、P79350组(P79组,P79350 0.8μg )、SB202190组(SB组,SB202190 0.4μg).后三组再分为再灌注1 d、3 d和5 d三个亚组,每亚组8只动物.行开阔迷宫法作行为学检查,HE染色计数海马CA1/3区存活细胞数,TUNEL法检测海马CA1/3区凋亡细胞.所有动物脑缺血及麻醉苏醒期间维持脑温37±0.5℃.结论:p38参与了脑缺血再灌注损伤,其特异性激动剂P79350能够加重沙土鼠脑缺血再灌注后海马CA1和CA3区神经元损伤,而其特异性抑制剂SB202190能够减轻沙土鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经元损伤.第二部分缺血预处理对沙土鼠脑缺血再灌注损伤及海马CA1/3区磷酸化的p38MAPK含量的影响目的:研究缺血预处理对沙土鼠脑缺血再灌注损伤及海马CA1/3区磷酸化的p38(p-p38)含量的影响.方法:建立沙土鼠3 min前脑缺血预处理模型.动物随机分为假手术组(SH)、预缺血组(IA组,前脑缺血3 min)、缺血再灌注组(IR组)、预处理组(IP组).后三组再分为再灌注15 min、2 h、6 h、1 d和5 d亚组,每亚组8只动物.前四亚组用免疫组化法测定海马CA1/3区p-p38含量,Leica Qwin图像分析系统行半定量分析.再灌注1 d、5 d两亚组观察行为学变化和海马CA1/3区形态学存活细胞数目.所有沙土鼠脑缺血期间及麻醉苏醒期维持脑温37±0.5℃.结论:3min预缺血可引起海马CA1/3区p-p38水平轻度升高,但能降低24h后5min缺血再灌注引起的p-p38水平的上升程度.缺血预处理可通过减少缺血再灌注损伤时海马神经元p-p38含量而减少神经元死亡.第三部分缺血预处理和p38MAPK特异性抑制剂对沙土鼠脑缺血再灌注损伤后活化的Caspase-3及HSP70含量的影响目的:探讨缺血预处理和SB202190的脑保护作用是否与改变活化的Caspase-3及HSP70含量有关.方法:动物模型同第一、二部分.动物随机分为假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)、预处理组(IP组)、SB202190 Ⅰ组(SB Ⅰ组,0.1 μ g)、SB202190Ⅱ组(SB Ⅱ组,0.4 μ g)和SB202190Ⅲ组(SBⅢ组,1.6 μ g)六组.后五组根据再灌注时间点不同再分为1 d、3 d、5 d 3个亚组,每亚组8只动物.用免疫组化法测定海马CA1/3区活化的Caspase-3及HSP70含量,Leica Qwin图像分析行半定量分析.所有沙土鼠脑缺血期间及麻醉苏醒期维持脑温37±0.5℃.结论:IP和SB202190的脑保护作用均与其减少缺血再灌注引起的活化的Caspase-3含量和增加HSP70含量有关.在一定剂量范围内SB202190脑保护效应呈剂量相关性,但效果明显弱于缺血预处理.