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目的：近年来细胞周期调控失调与肿瘤发生、发展关系的研究正成为肿瘤学、分子生物学研究的热点。胃癌是一种发病率很高的恶性肿瘤，尤其是在亚洲国家，其发病率和死亡率居各种消化道恶性肿瘤的首位。肿瘤的侵袭和转移是影响胃癌患者预后的主要因素，寻找及研究胃癌侵袭和转移相关基因及其蛋白在胃癌侵袭和转移过程中的表达变化，可以加深我们对胃癌侵袭和转移调控机制的理解和认识。目前有关胃癌侵袭和转移的研究开展较为广泛，诸多学者也对cyclinE和P27kip1在许多肿瘤中的表达进行了研究，但有关cyclinE和P27kip1基因及其蛋白在胃癌中的表达及与胃癌侵袭和转移关系的研究，国内外鲜有报道。本课题通过检测胃癌组织中cyclinE和P27kip1蛋白的表达，研究其与胃癌临床生物学行为的关系，从分子生物学水平探索胃癌细胞侵袭和转移的机制，为胃癌侵袭和转移的早期诊断、预后评估及靶向治疗提供分子生物学依据。
方法：收集1996年6月至2000年12月行胃癌根治手术患者100例，术前均未行放疗、化疗，术后常规取胃癌组织包埋制备蜡块；另取正常胃粘膜30例做对照。按胃癌诊治规范分析统计相关资料。术后随访43例。所有组织蜡块常规切片一式三份，一份行常规HE染色，常规病理观察；另两份采用免疫组织化学方法(LSAB法)检测胃癌组织和正常胃粘膜中cyclinE和P27kip1蛋白的表达水平，分析其表达变化与胃癌患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、肿瘤大体分型、肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、PTNM分期及预后等临床生物学行为的关系。所有资料应用SPSS11.0软件进行统计学分析。
结果：
1CyclinE蛋白阳性表达率在胃癌中(59％)显著高于正常胃粘膜(0％)(P＜0.01)；P27kip1蛋白阳性表达率在胃癌中(38％)显著低于正常胃粘膜(100％)(P＜0.01)。均有显著差异。
2CyclinE和P27kip1在胃癌组织中的蛋白表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤发生部位、大小及大体分型均无关(P＞0.05)。
3CyclinE在胃癌组织中的蛋白表达，低分化腺癌表达阳性率为67.1％(47/70)，高于高、中分化腺癌的40.0％(12/30)(P＜0.05)；浸润深度T3+T4组表达阳性率为77.4％(41/53)，高于T1+T2组的38.3％(18/47)(P＜0.01)；有淋巴结转移组表达阳性率为71.4％(40/56)，高于无淋巴结转移组的43.1％(19/44)，(P＜0.01)；PTNM分期Ⅲ、Ⅳ期组的表达阳性率为83.7％(36/43)，高于Ⅰ、Ⅱ期组的40.6％(23/57)(P＜0.01)。差异均有显著性。
4P27kip1在胃癌组织中的蛋白表达，低分化腺癌的表达阳性率为31.4％(22/70)，低于高、中分化腺癌的53.3％(16/30)(P＜0.05)；浸润深度T3+T4组的表达阳性率为18.9％(10/53)，低于T1+T2组的59.6％(28/47)(P＜0.01)；有淋巴结转移组的表达阳性率为25.0％(14/56)，低于无淋巴结转移组的54.5％(24/44)(P＜0.01)；PTNM分期Ⅲ、Ⅳ期组的表达阳性率为11.6％(5/43)，低于Ⅰ、Ⅱ期组的57.9％(33/57)(P＜0.01)。差异均有显著性。
5CyclinE蛋白表达阳性组胃癌患者术后5年生存率为9.1％(2/22)，显著低于CyclinE蛋白表达阴性组胃癌患者术后5年生存率52.4％(11/21)，两者比较差异有显著性(P＜0.01)。
6P27kip1蛋白表达阳性组胃癌患者术后5年生存率为50.0％(10/20)，显著高于P27kip1蛋白表达阴性组胃癌患者术后5年生存率13.0％(3/23)，两者比较差异有显著性(P＜0.01)。
7胃癌组织中cyclinE蛋白表达阳性组P27kip1蛋白表达阳性率为15.3％(9/59)，显著低于cyclinE蛋白表达阴性组的70.7％(29/41)，差异有显著性(P＜0.01)。
结论：
本研究采用免疫组织化学方法(LSAB法)检测正常胃粘膜和胃癌组织中cyclinE和P27kip1蛋白表达水平，同时分析其表达水平与胃癌侵袭和转移的能力、胃癌临床生物学行为及预后的关系，结论如下：
1在正常胃粘膜中，cyclinE蛋白不表达，而P27kip1蛋白全部表达，阳性率为100％。在胃癌中，cyclinE蛋白表达阳性率(59.0％)显著增高，而P27kip1蛋白表达阳性率(38.0％)显著降低。提示二者的异常表达导致了细胞周期调控失调，参与了胃癌的发生。
2在胃癌组织中，cyclinE蛋白和P27kip1蛋白表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤发生的部位及肿瘤大体分型均无关(P＞0.05)。
3在胃癌组织中cyclinE蛋白表达随着肿瘤的分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结转移及PTNM分期增加而明显增强(P＜0.05或P＜0.01)；P27kip1蛋白表达随着肿瘤的分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结转移及PTNM分期增加而明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。表明cyclinE和P27kip1蛋白表达与胃癌临床病理进展有关，提示cyclinE和P27kip1参与了胃癌的侵袭和转移，可能预示胃癌的恶性程度和预后。
4胃癌组织中，cyclinE蛋白表达阳性组5年生存率较表达阴性组明显降低(P＜0.01)；而P27kip1蛋白表达阳性组5年生存率较表达阴性组明显增高(P＜0.01)。提示cyclinE和P27kip1蛋白表达水平是影响胃癌患者预后的重要生物学指标，可作为胃癌预后评价指标之一。
5胃癌组织中，cyclinE蛋白高表达时P27kip1蛋白低表达，反之cyclinE蛋白低表达时P27kip1蛋白高表达(P＜0.01)。提示在胃癌的发生和发展过程中cyclinE和P27kip1蛋白表达具有拮抗作用。联合检测cyclinE蛋白和P27kip1蛋白表达对判断胃癌患者的预后和指导临床综合治疗有重要意义。
总之，我们认为cyclinE和P27kip1蛋白的异常表达在胃癌的发生、发展以及侵袭和转移中发挥重要作用，是胃癌侵袭和转移的重要分子生物学基础，检测胃癌组织中cyclinE和P27kip1蛋白表达，可从细胞、分子水平了解胃癌的发生、发展过程，帮助阐明胃癌侵袭和转移的机制。联合检测cyclinE和P27kip1蛋白表达，对胃癌侵袭和转移的早期诊断、预后评估及治疗靶向的发展具有重要意义。