基于不同方法提取茜草精油的化学组成及功能性研究

来源 :陕西师范大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:rserrrrr
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茜草(Rubia cordifolia L.),系茜草科多年生攀援草本植物,茜草根具有行血止血、通经活络、止咳祛痰、祛瘀通经、改变体质效用并兼具有利尿剂属性的功效,是我国一种传统的中药。茜草资源在我国地域上的分布较为广泛,尤其是陕西渭南地区。系统的研究和深入对茜草资源的认识,对我国的中医药发展及促进当地经济有一定意义。本文所用的茜草原料采集于陕西省渭南市南塬一带,对我国传统中药茜草的挥发性成分——茜草精油进行了研究,主要分析茜草精油的化学组成及其生物学功能。1.大叶茜草素、呋喃大叶茜草素、4-叔丁基-2-苯基-苯酚、3-甲基-2-环戊烯酮、β-桉叶油醇和11-羟基大麻酚等物质成分被鉴定是水蒸气蒸馏法所得茜草精油的主要成分;呋喃大叶茜草素、大叶茜草素、β-桉叶油醇、4-叔丁基-2-苯基-苯酚、丁香酚、鲨烯和3-甲基-2-环戊烯酮被证实则为超临界CO2流体萃取所得茜草精油的主要成分。另外,水蒸气蒸馏法及超临界C02流体萃取法得到的茜草精油在表观状态方面也有一定差异。如:水蒸气蒸馏得率较低,呈亮黄淡绿色晶片状固体,具特征性刺激性气味;而超临界CO2流体萃取法所得精油得率稍高,呈橙红色粘稠状固体,具特征性刺激性气味。固相微萃取茜草精油主要成分为苯乙醛、长叶薄荷酮、香叶基丙酮、3-甲基-2-环戊烯酮和芳姜黄烯。2.采用水蒸气蒸馏法及超临界CO2流体萃取法所得的精油和七种细菌为材料进行了抑菌实验。S.epidermidis B.cereus和S.typhimurium对于水蒸气蒸馏所得茜草精油表现更为敏感;S.aureus,S.epicdermidis,B.subtilis 和 S.typhimurium 则对于超临界CO2流体萃取的茜草精油更为敏感。大体上讲,超临界CO2流体萃取的茜草精油强于水蒸气蒸馏法提取的茜草精油其抑菌活性。3.茜草精油与微生物细胞相互作用后,茜草精油干扰了微生物的生长,从生长曲线可以看出,茜草精油明显延迟了微生物细胞的对数生长期。微生物细胞表面、内部结构、形态均发生了较为明显的改变,遭受了一定程度的破坏,如细胞表面不再规整,有细胞内容物的溶解与溢出。茜草精油处理后的微生物菌体细胞壁、细胞膜和细胞质均表现出不同于原始细胞的形态。4.水蒸气蒸馏法及超临界CO2流体萃取法所得的茜草精油在不同的抗氧化体系中表现出较为明显的抗氧化活性,其中水蒸气蒸馏法所得茜草精油的抗氧化活性在三价Fe离子的还原力体系,不同类型自由基介导的2-脱氧-D-核糖裂解的作用体系,H2O2的清除体系,以及各类自由基如DPPH、OH-、ABTS等的清除体系中的表现更为明显。5.两种自由基体系如·OH和ROO·所引起的pBR322质粒DNA的损伤,经过两种不同方法所得精油的干预之后,结果表明:两种方法所得精油均表现出对于已有损伤较强的修复效果,且水蒸气蒸馏提取法所得的茜草精油对·OH介导的DNA损伤的保护作用强于ROOC。6.两种不同方法所得精油对AAPH引发的ROO·自由基介导的牛血清白蛋白的损伤都具有一定程度的保护作用,且保护效果与浓度呈正相关。7.两种肿瘤细胞如人宫颈癌Hela和乳腺癌MCF-7细胞经过两种不同方法所得茜草精油的干预之后,肿瘤细胞形态、生长和增殖受到抑制,且两种不同方法所得的茜草精油对于肿瘤细胞的抑制与茜草精油浓度呈现较好的相关关系。水蒸气蒸馏法所得精油比超临界流体萃取法所得的精油抑制肿瘤细胞增殖作用更显著;Hela细胞对于两种精油具有比MCF-7细胞更强的敏感性。形态学的观察结果表明,茜草精油可以诱导人人宫颈癌Hela和乳腺癌MCF-7细胞的凋亡,凋亡后的肿瘤细胞形态与对照组差异显著。8.水蒸气蒸馏提取法所得的茜草精油对CCl4所致小鼠肝损伤具有一定的保护作用,能显著抑制CCl4所致小鼠肝损伤中相关检测指标的升高,如小鼠肝脏指数、脾脏指数、血清中典型检测指标如AST、ALT和AKP;小鼠肝脏中抗氧化酶活指标如SOD、CAT和GSH-PX。动物实验结果证实茜草精油作用小鼠肝损伤保护的剂量以中、高剂量较好。病理组织切片观察结果表明,茜草精油干预后的小鼠其肝脏受损细胞和组织明显得到了修复,可见茜草精油有预防CCl4所介导的急性肝损伤效果。9.福林酚法测定出两种不同方法所得的茜草精油的总酚含量不同,其中以水蒸气蒸馏法所得精油中总酚含量较高,而超临界流体萃取法所得精油中总酚含量较低。两种不同方法所得茜草精油中的总酚含量的高低可以解释其体外抗氧化活性、抗肿瘤活性等生物活性的强弱,茜草精油中的总酚含量与生物活性间有一定地呈正相关性关系。
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