Ngb(Neuroglobin)是重要的神经保护蛋白,能够抗缺血缺氧、氧化应激等神经病理条件诱导的神经损伤,但其神经保护机制还有待深入研究;最近有文献表明Ngb还具有抑制肿瘤和促进神经突触发生的作用。Dvll(Dishevelled 1)是经典Wnt信号通路中重要转导分子,参与了细胞生存、分化等生理活动的调节,与形态发育和肿瘤发生密切相关。我们前期酵母双杂交实验表明,Ngb能够与Dvll相互作用,但是对于二者的相互作用并没有深入的研究,而且鲜有文献报道Ngb对Wnt通路的影响。首先,我们在SKNSH细胞中通过免疫荧光共定位实验和免疫共沉淀实验进一步证实了 Ngb与Dvll之间存在直接的相互作用。其次,我们发现Ngb能够在SKNSH细胞中剂量依赖地降低外源过表达的Dvll以及内源的Dvll蛋白水平。用CHX阻断蛋白合成后,在过表达Ngb的情况下Dvll蛋白的降解速率明显更快。然后,分别用蛋白酶体途径的抑制剂MG132和溶酶体途径的抑制剂NH4Cl处理细胞,发现只有MG132能够抑制Ngb引起的Dvll的降解;泛素化实验则发现Ngb能够增强Dvll的泛素化程度。最后,在SKNSH细胞中通过荧光素酶报告实验,我们发现随着Ngb剂量的增加荧光素酶报告质粒βTAL-Luc-TOP的转录活性会显著地降低;而且western blot结果表明Ngb在SKNSH细胞中能够下调β-catenin。这说明Ngb能够抑制Wnt信号通路。因此,我们的研究阐明了 Ngb对Wnt信号通路的影响及其机制:Ngb通过与Dvl1相互作用,增强Dvl1的泛素化程度,促进Dvl1的降解进而抑制Wnt信号通路。为研究Ngb的功能和机制提供新的思路和参考,为研究Ngb与Wnt信号通路的关系奠定了基础。