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目的 研究反义凝血酶受体在血管平滑肌细胞增殖中的作用,探讨凝血酶受体反义序列抑制血管平滑肌细胞增殖机制。 方法 用细胞转染、RT-PCR、West-Blot、~3H-TdR掺入实验、~3H-肌醇掺入实验、EILSA实验对血管平滑肌细胞的凝血酶受体的表达进行检测和对血管平滑肌细胞的增殖情况进行检测,确定反义凝血酶受体对血管平滑肌细胞增殖的影响。 结果 反义凝血酶受体明显抑制血管平滑肌细胞的增殖(与对照组、正义组相比,P<0.05);明显抑制血管平滑肌细胞的凝血酶受体mRNA和蛋白的表达;明显抑制了血管平滑肌细胞磷酸肌醇代谢。 结论 凝血酶受体反义序列明显抑制血管平滑肌细胞的增殖,其机制是通过抑制凝血酶受体基因的表达(mRNA和蛋白的表达),抑制细胞内信号传递来完成。凝血酶在血管病变中的作用有重要意义,为应用反义技术治疗血管性疾病(动脉粥样硬化及冠状动脉血管腔内成形后再狭窄)中血管平滑肌细胞增殖提供理论和实验依据,并为下一步构建反义表达载体治疗血管性疾病奠定基础。