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本文以葵花籽为原料,首先提取绿原酸;然后采用碱溶酸沉法从中提取分离蛋白,再利用复合酶解法与超声波裂解技术制备小分子葵花籽多肽,经膜技术分离纯化后,对该多肽的抑制亚硝化反应、抗红细胞溶血及抗酒精性肝损伤等作用进行了系统研究。结果表明:1、用醇溶法提取脱脂葵花籽粉中的绿原酸,最佳工艺条件为温度40℃、乙醇浓度50%、pH6.0、料液比1:20浸提时间2h,其得率为2.46%。提取液用正丁醇-冰醋酸-水(4:2:5)作为展开剂进行薄层定性鉴定,发现样品与绿原酸标品在相应位置显现相同的斑点,说明提取物中含有绿原酸。2、试验采用碱溶酸沉法提取葵花籽分离蛋白,然后用碱性蛋白酶和复合酸性蛋白酶两阶段酶解制备葵花籽多肽。在制备过程中结合超声波辅助酶解,可以使该多肽的水解效率明显提高。Tricine-SDS-PAGE电泳和SephadexG-25凝胶层析分析表明,本工艺所得葵花籽多肽的主要成分是小于3.4kDa的多肽,其中3000Da以下的占78.41%。3、前工序得到的葵花籽多肽溶液在操作压力0.3MPa,浓度2%,pH值6.0的条件下依次经过截留量为4000Da和2000Da的超滤膜进行超滤分离,得到4000Da以上(SSP1)、4000~2000Da(SSP2))和2000Da以下(SSP3)三种不同分子量的葵花籽多肽组分。超滤后的样品用纳滤和反渗透组件进行脱盐处理,结果表明,纳滤和反渗透脱盐率均较高,但是反渗透处理对总氮的损失较大,而纳滤总氮损失率仅为12.17%,综合考虑,只选用纳滤装置进行脱盐处理。4、本研究对SSP1、SSP2和SSP3三种不同分子量的葵花籽多肽进行了体外清除亚硝酸盐和阻断N-二乙基亚硝胺合成的作用,以及抑制红细胞自氧化溶血和H202诱导红细胞氧化溶血等抗氧化活性的比较研究。结果表明,分子量在4000-2000Da的葵花籽多肽(即SSP2)在清除NaNO2、抑制亚硝胺合成以及抑制红细胞氧化溶血等方面的效果最强,是制作食源性防癌和抗氧化剂的理想原料。5、用SSP2葵花籽多肽饲喂小鼠,进行抗酒精性肝损伤实验,结果表明,该组分的高剂量组能使小鼠肝脏中丙二醛含量明显下降,还原性谷胱甘肽含量显著提高;血清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶活力明显降低;与肝损伤模型组相比,差异显著(P<0.05),说明4000-2000Da葵花籽多肽组分对预防酒精性肝损伤有明显的作用。