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鸡球虫病是一种呈世界性分布的原虫病,由艾美耳属球虫寄生在鸡的肠道上皮细胞内而引起,该病给养鸡业造成了十分严重的危害。在我国,它是当前养鸡业最为多发、危害严重且防治十分困难的疾病之一。本试验通过对安徽省部分地区林地放养鸡感染球虫情况进行调查,对卵囊分离与鉴定,用所获球虫建立动物感染模型。根据鸡球虫和鸡的生物学特性及生理特点,研发出有预防鸡球虫病的中草药制剂,并对中草药复方制剂的进行安全性研究,以便为养鸡生产防治该病提供新的手段。 首先,从安徽省舒城县、霍山县、合肥市庐阳区和青阳县等4个县(区)境内取林地放养的地方土种鸡作为检查对象,用群体采样法从林地采集鸡的新鲜粪样138份,采用饱和盐水漂浮法对每个粪样进行检查,并对种类进行初步鉴定。结果表明:球虫总感染率为55.80%(77/138);分离球虫卵囊并在28℃环境下培养至85%卵囊发生孢子化,再对孢子化卵囊做形态学鉴定,本次共检出5种球虫,即柔嫩艾美耳球虫(Eimeria.tenella)、和缓艾美耳球虫(E.mivati)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)和毒害艾美耳球虫(E.necatrix)。 其次,用收集的混合球虫卵囊以不同剂量做雏鸡感染试验,确定以每只14d龄雏鸡接种6×104个孢子化卵囊为最适宜量。此感染剂量下,试验鸡的肠道病变明显,卵囊发育成熟,死亡率为20%。根据中医药理论的组方配伍原则,第一次组方以抗外感虫邪的中草药为主药,经鸡体试验,选出以苦参为主药成分的复方,再配合其它药物止血、止痢等组方,根据第一次结果对组方进行适当加减,进行第二次鸡体试验,又对组方进行适当调整,并于西药对照,再进行第三次鸡体试验,筛选出一个对鸡球虫病有较好预防效果的方剂,该复方由苦参9份、白头翁4份、紫珠叶3份、辣蓼2份、丹皮2份等组成,其综合抗球虫指数(ACI)为175,抗球虫效果优于化学合成药地克珠利、马杜拉霉素和磺胺氯毗嗪钠(化学合成药对照组ACI依次为143、152、157)。 最后,对中草药复方制剂的安全性进行了动物试验。对小鼠进行急性毒性试验,其灌胃剂量达到14.51g/kg,整个试验过程中未出现由于药物毒性引起的死亡,未见明显异常。对雏鸡进行安全性试验,用装有已知重量的中草药散剂空胶囊中进行口服,以雏鸡为对象进行急性毒性试验,在给药剂量达到6.75g/(kg.d),对鸡进行药物最大耐受量试验,剂量达20g/(kg.d)时,雏鸡全部存活,未见明显症状,说明该复方安全范围较大;进行亚慢性毒性试验,给药剂量为10、5、2.5g/(kg.d),每天给药,连续饲喂21d,停药后进行可逆性观察14d,结果发现各主要脏器无可见病变;脏器指数中肝脏指数高剂量组第21d时表现为显著升高(P<0.05),免疫器官指数中脾脏指数中剂量组表现出显著性升高(P<0.05),法氏囊指数表现为2.5g/(kg.d)组显著升高(P<0.05)。饲喂21d进行血清酶检测,中剂量组谷草转氨酶(AST)显著降低(P<0.05),高、低剂量组碱性磷酸酶(ALP)显著升高(P<0.05),提示肝脏受到损伤。低剂量组尿素(BUN)表现出显著降低(P<0.05),可能是有肾前性的心力衰竭或急性、慢性肾炎等。停药后14d测定血清酶,各试验组鸡的血清酶均与对照组差异不显著(P>0.05),说明此中草药复方制剂对于肝肾功能的损伤是可逆性的,连续饲喂预防鸡球虫病是安全的。 由此可见,上述结果取得,初步阐明了安徽地区感染鸡球虫的种类,为该地区鸡球虫病的防治提供相关理论基础;抗鸡球虫中草药复方制剂的研制,不仅给鸡球虫病防治提供了新的手段,而且为解决化学药物残留、环境污染等问题也具有重要意义。