目的:肝纤维化是由慢性肝损伤所引起的肝组织病理变化,持续的肝损伤最终会导致肝硬化。目前针对肝纤维化的诊断与治疗上并没有有效的靶点和药物。Myocardial Infarction-Associated Transcript（MIAT）是一种长链非编码 RNA,在多种疾病中异常表达,且MIAT在纤维化相关疾病如心肌纤维化、肾纤维化中发挥着促进作用。MIAT是否在肝纤维化中发挥作用尚无报道。因此,本研究对MIAT在肝纤维化中的作用及相关分子机制进行了初步研究,对肝纤维化相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。方法与实验设计:在细胞水平上,通过TGF-β1诱导肝星状细胞LX2激活,检测MIAT的表达。在LX2细胞中采用CRISPR-dCas9的方法激活MIAT的表达,检测纤维化相关基因的表达。在LX2细胞中采用siRNA和shRNA敲低MIAT的表达,检测纤维化相关标志基因的表达。在稳定敲低MIAT的LX2细胞中,通过CCK8检测MIAT对细胞增殖的影响。在机制研究上,通过对敲低及过表达MIAT细胞进行转录组测序,发现并证实了差异表达的基因TGFB2。通过DIANA tools、miRCODE、Starbase、Targetscan、GEO 等生物信息学平台筛选出与 MIAT、TGFB2结合的miRNA分子miR-16-5p,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-16-5p 与 MIAT 和 TGFB2 的结合。通过 RT-qPCR 验证 miR-16-5p 在 TGF-β1和TGF-β2刺激的LX2中的表达,在过表达MIAT的LX2中的表达。随后在LX2细胞中过表达miR-16-5p,采用RT-qPCR验证MIAT、TGFB2及相关纤维化基因的表达,同时通过CCK8和SRB检测miR-16-5p对细胞增殖的影响。最后,我们通过RT-qPCR和Western blot检测TGFB2在过表达和敲低MIAT细胞中的表达,在TGF-β2刺激的LX2细胞中采用RT-qPCR检测MIAT的表达,从而验证MIAT与TGFB2之间的调控机制。结果:MIAT在TGF-β1刺激的LX2中高表达;过表达MIAT会上调纤维化相关基因的表达,敲低MIAT则导致相反的结果,另外,敲低MIAT抑制了细胞的增殖;双荧光素酶报告基因实验结果证实了 miR-16-5p与MIAT和TGFB2的结合;miR-16-5p过表达会下调MIAT、TGFB2及纤维化相关基因的表达,同时抑制细胞的增殖;miR-16-5p和MIAT分别在TGF-β2刺激的LX2细胞中表达下降和上升。结论:上述研究结果,初步证实了 MIAT对肝星状细胞的活化及肝纤维化基因表达的促进作用,并阐明了 MIAT通过与TGFB2内源竞争miR-16-5p调控肝纤维化的分子机制,为肝纤维化的机制研究和靶向治疗研究提供了新的思路和干涉靶点。