背景:胰腺癌（Pancreatic cancer,PC）是一种恶性程度高、预后极差的实体肿瘤,而缺氧又是实体肿瘤的重要特征之一。缺氧可增加缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）的稳定性并将其移位到细胞核内,与下游靶基因启动子区的缺氧反应元件（Hypoxia responsive element,HRE）结合,并调控其转录。本课题组前期用生物信息学分析ITPR1启动子区域中存在4个潜在的HRE,且采用质谱法（LC-MS/MS）发现1,4,5-三磷酸肌醇受体Ⅰ型（Inositol 1,4,5-triphosphate receptor type Ⅰ,ITPR1 or IP3R1）在缺氧状态下显著上调,提示缺氧诱导ITPR1表达上调可能由HIF-1 α途径实现。除此之外,已有研究发现表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor,EGFR）/JAK激酶2（Janus kinase 2,JAK2）/信号转导及转录激活子3（Signal transduction and activators of transcription 3,STAT3）信号通路参与PC侵袭迁移的过程。目的:1、比较胰腺导管腺癌（Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）组织与正常胰腺组织中HIF-1α、ITPR1、EGFR、p-JAK2和STAT3蛋白分子表达的差异,并探讨这些蛋白与PDAC患者临床病理特征及预后之间的关系。2、检测缺氧诱导PC侵袭转移中的相关分子机制。3、进一步研究在缺氧状态下ITPR1敲低后对胰腺癌细胞株Panc-1体外增殖及侵袭迁移的影响。方法:1、采用免疫组化法检测78例PDAC组织和20例正常胰腺组织中HIF-1α、ITPR1、EGFR、p-JAK2和STAT3的表达,并分析这些蛋白与PDAC患者临床病理特征及预后的关系。2、应用实时荧光定量PCR及Western-blotting检测常氧、缺氧状态下敲低ITPR1后HIF-1α、ITPR1、EGFR、p-JAK2和STAT3的表达及沉默HIF-1α后ITPR1的表达;用双荧光素酶报告基因系统检测ITPR1启动子区域是否存在HRE,并定点突变潜在的HRE,确定ITPR1启动子区域与HIF-1α的结合位点。3、用MTS细胞增殖实验及Transwell细胞侵袭迁移实验检测敲低ITPR1的Panc-1细胞在常氧和缺氧状态下的细胞增殖及侵袭迁移能力。结果:1、HIF-1α、ITPR1、EGFR、p-JAK2和STAT3在PDAC中的表达均增高,且HIF-1α、ITPR1、EGFR及STAT3与PDAC的肿瘤生物学行为相关,尤其是转移,HIF-1α及EGFR的高表达可影响PDAC患者的术后生存时间。2、缺氧可提高Panc-1中HIF-1α、ITPR1和EGFR信号转导通路的表达量,且敲低ITPR1后EGFR轴相关分子表达下降而HIF-1α表达无明显变化,沉默HIF-1α后ITPR1表达下降;ITPR1启动子区域存在HIF-1α的结合位点HRE2（-903,-916）。3、Panc-1细胞敲低ITPR1后细胞增殖能力下降,而在常氧和缺氧条件下Panc-1细胞增殖的能力相似;在缺氧状态下体外侵袭迁移能力增强,且敲低ITPR1后Panc-1细胞的侵袭迁移能力降低。结论:1、HIF-1α、ITPR1、EGFR、p-JAK2和STAT3在PDAC组织中的表达量均增高,且HIF-1α、ITPR1、EGFR及STAT3与PDAC的转移有关;其中,HIF-1α及EGFR高表达是影响PDAC患者术后独立的预后因素。2、缺氧可提高Panc-1中HIF-1α、ITPR1和EGFR信号通路分子的表达量,敲低ITPR1后EGFR轴相关因子表达下降而HIF-1α的表达量无明显变化,干扰HIF-1α后ITPR1表达下降,且ITPR1启动子区域存在HIF-1α的特异性结合位点,提示ITPR1是HIF-1α的靶基因,且ITPR1可以调控EGFR、p-JAK2和STAT3的表达。3、敲低ITPR1可降低Panc-1细胞的增殖能力,而缺氧不影响Panc-1细胞增殖能力;缺氧可增强体外侵袭迁移能力可能是通过HIF-1α调控ITPR1的表达而实现。