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华石斛(D.sinense)为海南特有种,具有极高的药用价值,但其对生境要求高,种子自然繁殖率低,生境破坏及人为采摘严重,导致野生石斛资源不断减少。组织培养技术可以加速种苗扩繁,但组培苗从炼苗到小苗种植技术不成熟,制约了其产业发展。因此,本试验通过对华石斛组培苗瓶苗炼苗处理、基质筛选、光照处理、水肥管理和种植模式进行研究,来探索华石斛驯化和栽培的生长规律,提高小苗成活率,完善其种植技术。研究结果将对华石斛野生资源的保护和合理利用具有重要意义,研究主要结果如下:(1)组培瓶苗炼苗通过进行中低两个海拔、两种遮阴度和两种炼苗时长的研究,发现在中海拔978m使用50%的遮阴网进行炼苗,年平均温度20.7℃,7月平均24.7℃,1月平均16.0℃,昼夜温差7-15℃,华石斛苗生长良好;年平均光照强度56.16μmolco2·m-2·s-1,华石斛壮苗程度明显;在炼苗四个月后可得到组培苗:茎长平均2.8cm、茎粗平均0.24cm、平均每株3条根、根长3-4cm;组培苗规格越大,适应性更强,生长情况相对较好。(2)炼苗基质筛选华石斛组培苗在炼苗初期,做了10种基质预处理,发现使用水苔做基质组培苗生长良好,进一步试验发现使用5cm透明塑料杯种植,保水性较好、气水比达2.58,用量为16.3g。两个月的存活率和新芽率在50%以上和15%以上,鲜重增长量在15%左右,壮苗指数和净光合速率都为最大,即0.016和7.806μmol CO2·m-2·s-1,八个月后长出大量新根,根系活力为0.420mg·g·h-1。(3)小苗光照条件研究试验采用三种遮阴度,全光照为对照,每个处理90株。在全光照时,华石斛小苗2周内快速死亡,在50%的遮阴时光照度较高,生长量增加较快,壮苗指数较高,但高光强容易晒伤小苗,叶片变黄、脱落,净光合速率为2.743μmol CO2·m-2·s-1;当遮阴度高于75%时,华石斛小苗容易出现烂根烂叶现象,光合作用低下;光照度为75%左右时,华石斛生长较为正常,光照充足,净光合速率为5.063μmol CO2·m-2·s-1,在适应环境后生长稳定。(4)小苗水肥管理研究华石斛苗对水肥较为敏感,基质湿度太大容易烂根、烂茎、病害严重,湿度过低小苗易脱水损伤。试验通过5种施水频率控制基质相对含水量,采用5种施肥浓度,不施肥为对照,每个处理90株。发现采用2天/次的施水频率,使基质相对含水量保持在20-28%,利于根系进行水分吸收,华石斛小苗存活率和新芽率较高,为58%和24%;在炼苗前期使用高浓度肥易烧苗,不施肥小苗生长不良,叶片易变黄,使用花多多高N肥2500的稀释倍数,小苗鲜重和叶面积增长15%和13%,叶片深绿,壮苗指数和净光合速率高达0.016和11.243μmol CO2·m-2·s-1。(5)林下种植模式研究通过低(204 m)、中(978m)、高(1118 m)三个海拔梯度,通过四种绑缚方式进行林下种植,中低海拔温度较高、湿度较低,自然环境无法满足小苗存活条件,人工降温增湿可一定程度上提高存活率,但效果不佳;在高海拔原生境种植,生长环境与野生苗一致,使用麻绳和少量水苔绑缚可保湿、透气,3个月后存活率为最高,达63%,且生长良好。综合试验发现,在海拔978m,平均温度在25℃左右,年平均湿度95%以上,采用50%的遮阴度瓶苗炼苗较粗壮,壮苗率高;使用水苔作基质在5cm透明塑料杯种植进行炼苗,华石斛苗存活率高;小苗在秋季种植温湿度适宜,采用75%的遮阴网、两天/次施水使基质相对含水量在20-28%、使用稀释2500倍的花多多高N肥,华石斛小苗各生长指标良好;结合以上试验最优处理,得到的华石斛苗生长8个月后新根和新芽较多,根系活力达到0.413 mg·g·h-1;同时在1118m原生境采用麻绳和水苔绑缚进行林下种植,华石斛小苗长势较好。