腹泻型肠易激综合征患者升结肠黏膜类胰蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶的表达变化及其意义

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目的:检测腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者和健康对照者升结肠黏膜类胰蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶的表达水平,并探讨它们与IBS-D症状的关系。方法:符合RomeⅢ标准的IBS-D患者20例、健康对照组10例纳入研究,在接受电子肠镜检查时取升结肠黏膜标本3块,称质量、生理盐水漂洗后迅速在2ml HBSS平衡盐液中37℃下孵育1 h,ELISA法和Western blotting法检测孵育上清液中类胰蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶水平, RT-PCR法检测升结肠黏膜类胰蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶mRAN表达。类胰蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶表达水平与IBS-D患者的胃肠道症状评分进行相关性分析。结果:1、ELISA法结果:IBS-D患者升结肠黏膜组织孵育上清液中类胰蛋白酶浓度为(0.070±0.011)ug/g组织,健康对照组为(0.043±0.006) ug/g组织,差异有统计学意义(P=0.000);而α1-抗胰蛋白酶浓度为(2.36±1.05mg/g组织)与健康对照组为(2.68±1.19 mg/g组织)的差异无统计学意义(P=0.455)。类胰蛋白酶浓度与胃肠道症状评分(GSRS)呈正相关( r =0.592, P =0.008)。2、RT-PCR法结果:IBS-D患者升结肠黏膜组织类胰蛋白酶相对表达度为0.83±0.06,健康对照组为0.58±0.13,差异有统计学意义( P =0.000);而α1-抗胰蛋白酶相对表达度为(1.02±0.19)与健康对照组为(0.97±0.17)的差异无统计学意义( P =0.413)。RT-PCR法检测的类胰蛋白酶相对表达度与GSRS也呈正相关(r=0.520, P =0.009)。3、Western blotting法结果:IBS-D患者升结肠黏膜组织类胰蛋白酶相对浓度为0.53±0.09,健康对照组为0.23±0.08,差异有统计学意义(P=0.000);而α1-抗胰蛋白酶相对浓度为(0.81±0.15)与健康对照组为(0.80±0.11)的差异无统计学意义(P=0.761)。Western blotting法测定的类胰蛋白酶相对浓度与GSRS呈正相关( r =0.421,P=0.032)。结论:腹泻型肠易激综合征患者升结肠黏膜中类胰蛋白酶的表达水平增加,而α1-抗胰蛋白酶表达无明显差异,这种变化与IBS-D的消化道症状相关,因此,升结肠肥大细胞中类胰蛋白酶表达增加可能与IBS-D症状的发生机制有关。
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